Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Cullina-4A para WB, IHC-P, ELISA - Q13619

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cullina-4A

• A CUL4A é a proteína de andaime das ligases E3 de ubiquitina do tipo cullina-RING, facilitando a transferência de ubiquitina ao posicionar o substrato e a enzima E2 (PubMed:14578910, PubMed:14739464, PubMed:15448697). Referências relacionadas: PMID:14578910 PMID:14739464 PMID:15448697

• A atividade da ligase E3 depende da neddilação da CUL4A; a CUL4A desneddilada liga-se à TIP120A/CAND1 para inibir o complexo (PubMed:14578910, PubMed:14739464, PubMed:15448697). Referências relacionadas: PMID:14578910 PMID:14739464 PMID:15448697

• A especificidade do substrato é determinada pelos fatores associados a DDB1-CUL4A (DCAFs): DCX(DET1-COP1) ubiquitina JUN (PubMed:14739464); DCX(DDB2) tem como alvo XPC (PubMed:15811626) e histonas H3-H4 para montagem do nucleossomo (PubMed:16678110, PubMed:17041588, PubMed:24209620). Referências relacionadas: PMID:14739464 PMID:15811626 PMID:16678110 PMID:17041588 PMID:24209620

• O complexo DCX(DTL) poliubiquitina CDT1 e p53/TP53 durante danos e replicação do DNA (PubMed:14578910, PubMed:15448697, PubMed:15548678) e media a autoubiquitinação de DTL (PubMed:23478445). Referências relacionadas: PMID:14578910 PMID:15448697 PMID:15548678 PMID:23478445

• A CUL4A, através de DCX(ERCC8), é essencial no reparo acoplado à transcrição (TCR) (PubMed:12732143, PubMed:32355176, PubMed:38316879). Referências relacionadas: PMID:12732143 PMID:32355176 PMID:38316879

• A CUL4A participa na via DesCEND ao direcionar proteínas com degrons C-terminais via complexos DCX contendo TRPC4AP ou DCAF12 (PubMed:29779948). Referências relacionadas: PMID:29779948

• O complexo DCX(AMBRA1) media a transição G1/S ao ubiquitinar a ciclina D (PubMed:33854232, PubMed:33854239) e regula complexos CRL5 ao degradar Elongina-C (PubMed:30166453). Referências relacionadas: PMID:33854232 PMID:33854239 PMID:30166453

• Juntamente com a CUL4B, a CUL4A contribui para a biogênese do ribossomo (PubMed:26711351). Referências relacionadas: PMID:26711351

• A CUL4A é uma fosfoproteína envolvida em interações hospedeiro-vírus e é um ator chave no sistema ubiquitina-proteassoma, impactando o reparo de DNA, o ciclo celular e os ritmos circadianos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 660–759; portanto, o anticorpo provavelmente reconhece um epítopo linear na região C-terminal da CUL4A humana. Este projeto frequentemente suporta detecção confiável em condições desnaturantes de Western blot (WB).
• Para WB, uma banda esperada em torno de 88 kDa deve ser observada; considere usar uma escada de proteínas com marcadores de peso molecular apropriados e otimizar as condições de bloqueio e incubação com anticorpo para o lisado de amostra específico.
• Para IHC-P, métodos de recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) podem ser benéficos; valide a especificidade da coloração em amostras de tecido humano relevantes usando controles apropriados.
• Aplicações de ELISA podem se beneficiar da otimização das concentrações de antígeno de revestimento e dos sistemas de detecção para garantir linearidade e sensibilidade; a natureza monoclonal deste anticorpo ajuda a reduzir a variabilidade entre lotes.
• Como o anticorpo é produzido em coelho, use anticorpos secundários anti-IgG de coelho para detecção; a reatividade cruzada com outras espécies não foi validada além do humano, portanto, verifique a reatividade se usar amostras não humanas.

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