Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Cullina 4A para WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13619

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Cullina-4A

• A CUL4A serve como uma proteína de andaime central dentro dos complexos de ligase E3 de ubiquitina cullina-RING (CRLs), permitindo a transferência de ubiquitina para proteínas substrato posicionando tanto o substrato quanto a enzima conjugadora de ubiquitina. A atividade da ligase é dependente da neddilação da cullina e é inibida pela associação da CUL4A desneddilada com a CAND1. Referências relacionadas: PMID:14578910, PMID:14739464, PMID:15448697
• O complexo DCX(DDB2) emprega a DDB2 como um receptor de substrato para ubiquitinar a XPC, as histonas H3-H4 e outros alvos, desempenhando papéis críticos no reparo por excisão de nucleotídeos e na montagem de nucleossomos acoplada à replicação. Referências relacionadas: PMID:15811626, PMID:16678110, PMID:17041588, PMID:24209620
• Através do complexo DCX(DTL), a CUL4A media a poliubiquitinação dependente de PCNA da CDT1 e a ubiquitinação dependente de MDM2 da p53/TP53 em resposta a danos no DNA e durante a replicação do DNA, e também direciona a autoubiquitinação da DTL. Além disso, o complexo DDB1-CUL4A-DTL regula o ritmo circadiano ubiquitinando a CRY1 para degradação. Referências relacionadas: PMID:14578910, PMID:15448697, PMID:15548678, PMID:23478445, PMID:26431207
• O complexo DCX(ERCC8) (complexo CSA) participa no reparo acoplado à transcrição (TCR), removendo lesões de DNA de genes ativamente transcritos. Referências relacionadas: PMID:12732143, PMID:32355176, PMID:38316879
• O complexo DCX(AMBRA1) funciona como um regulador mestre da transição do ciclo celular G1/S, direcionando a ciclina D fosforilada (CCND1, CCND2, CCND3) para ubiquitinação e degradação. Ele também regula complexos CRL5 através da ubiquitinação e degradação da Elongina-C (ELOC). Referências relacionadas: PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• A CUL4A está implicada na ubiquitinação de numerosos outros substratos, incluindo JUN (via DET1-COP1), CDKN1B/p27 (com DDB1-SKP2) e HOXA9, destacando seus amplos papéis regulatórios. Referências relacionadas: PMID:14739464, PMID:16537899, PMID:14609952
• Juntamente com a CUL4B, a CUL4A contribui para a biogênese do ribossomo. Referências relacionadas: PMID:26711351

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 1–300 da CUL4A humana, indicando que o anticorpo tem como alvo a região N-terminal; isso pode influenciar a acessibilidade do epítopo em certos ensaios.
• No Western blotting (WB), espere uma banda em aproximadamente 88 kDa; inclua inibidores de protease durante a lise e considere usar amostras frescas para evitar degradação.
• Para imunoprecipitação (IP), valide a capacidade do anticorpo de capturar complexos nativos de CUL4A em condições não desnaturantes.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), otimize os protocolos de fixação/permeabilização, pois a CUL4A é predominantemente nuclear; confirme a especificidade da coloração com controles apropriados.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada com CUL4A humana, de camundongo e rato; ao usar amostras de roedores, certifique-se de que o sistema de detecção seja compatível e que a banda alvo seja distinguível das imunoglobulinas endógenas no IP.
• Como um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; considere titular o anticorpo para cada nova aplicação e incluir controles positivos e negativos.

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