Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CX3CL1 para WB, IP, IHC-P, ELISA - O35188

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CX3CL1

• A Fractalcina (CX3CL1), também conhecida como ABCD-3 ou Neurotactina, é o único membro da subfamília de quimiocinas CX3C e existe tanto em formas ancoradas à membrana quanto em formas solúveis libertadas por clivagem proteolítica.
• A Fractalcina liga-se com alta afinidade ao recetor CX3CR1 e às integrinas ITGAV:ITGB3 e ITGA4:ITGB1, ativando sinalização a jusante que regula a adesão e quimiotaxia de células imunes. Referências relacionadas: PMID:10187784, PMID:18971423
• No sistema vascular, o eixo CX3CL1/CX3CR1 media a adesão firme de leucócitos a células endoteliais sob fluxo, um passo crítico na vigilância imune e inflamação. Referências relacionadas: PMID:10382755, PMID:9177350
• A forma ancorada à membrana promove a captura rápida e a adesão de células imunes sob fluxo de cisalhamento, enquanto o domínio quimiotático solúvel libertado atua como um quimioatraente para células T e monócitos.
• O CX3CL1 é expresso predominantemente no cérebro, com níveis mais baixos de mRNA detetados no rim, coração, pulmão, músculo esquelético e testículo, sendo indutível em células dendríticas e células B ativadas.
• A localização subcelular é dinâmica: a proteína de comprimento total reside na membrana celular como uma proteína transmembranar tipo I com um domínio quimiotático extracelular, enquanto a clivagem mediada por ADAM liberta o segmento quimiotático solúvel.
• Palavras-chave funcionais incluem quimiotaxia, adesão celular, resposta inflamatória e tráfego de células imunes, sublinhando o seu papel tanto na vigilância imune homeostática quanto patológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio abrange os aminoácidos 25–337, englobando todo o domínio extracelular (domínio quimiotático e haste semelhante à mucina) do CX3CL1 de rato. Este desenho pode permitir que o anticorpo detete tanto as formas ligadas à membrana quanto as libertadas.
• Para Western blotting, é esperada uma banda por volta de 42 kDa; considere usar lisados de cérebro ou rim como controlos positivos.
• Em IHC-P, é recomendada a otimização da recuperação antigénica e o uso de tecidos que expressem CX3CL1 (por exemplo, secções de cérebro).
• O desenvolvimento de ELISA sanduíche pode ser viável ao emparelhar este anticorpo com um anticorpo detetor direcionado a um epítopo não sobreposto; valide em contextos de proteína recombinante ou amostra nativa.

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