Anticorpo monoclonal de coelho anti-CXCL10/IP-10 para WB e ELISA - P02778

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da CXCL10

• A CXCL10, também conhecida como IP-10, é uma quimiocina CXC pró-inflamatória crucial para a quimiotaxia, diferenciação e ativação de células imunes durante respostas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:11157474 PMID:22652417 PMID:7540647
• Ela facilita o recrutamento de linfócitos Th1 ativados para locais inflamatórios por meio da ligação ao CXCR3, o que é essencial para a imunidade antiviral. Referências relacionadas: PMID:12663757 PMID:12750173
• A ligação ao CXCR3 ativa a sinalização mediada por proteína G, levando ao aumento do fluxo de cálcio intracelular, da polimerização da actina e à ativação da via da fosfolipase C. Referências relacionadas: PMID:12750173 PMID:19151743
• É secretada principalmente por monócitos, células endoteliais e fibroblastos; sua expressão no epitélio tímico e na micróglia é fortemente induzida após estimulação viral. Referências relacionadas: PMID:11157474 PMID:12663757
• No SNC, o eixo CXCL10/CXCR3 coordena a migração da micróglia para locais de lesão, uma etapa fundamental no reparo e na reorganização neuronal.
• As características estruturais incluem um peptídeo-sinal N-terminal para secreção, duas pontes dissulfeto conservadas características das quimiocinas CXC e citrulinação pós-traducional.
• O peso molecular previsto da CXCL10 madura é de aproximadamente 10,9 kDa; este anticorpo detecta uma banda de 11 kDa compatível com a forma glicosilada ou não modificada em SDS-PAGE sob condições redutoras.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à proteína CXCL10 humana de comprimento total (aa 1-98, NP_001556.2), abrangendo o domínio da quimiocina secretada. Esse design permite o reconhecimento tanto da CXCL10 recombinante quanto da endógena.
• Para Western blotting, utilize condições de SDS-PAGE redutoras e carregue lisados de controle positivo apropriados (por exemplo, fibroblastos humanos ou monócitos estimulados com IFN-γ). Espere uma única banda em aproximadamente 11 kDa; considere o uso de um marcador de baixo peso molecular para uma determinação precisa do tamanho.
• Para ELISA, este anticorpo monoclonal pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção após a otimização padrão de um ELISA sanduíche. Valide o pareamento com um anticorpo anti-CXCL10 compatível para o formato específico do seu ensaio.
• Devido à especificidade humana do anticorpo, não se espera reatividade cruzada com a CXCL10 de camundongo ou rato; verifique em seu sistema experimental caso seja necessária reatividade cruzada entre espécies.
• Inclua etapas adequadas de bloqueio e lavagem para minimizar o sinal de fundo, especialmente ao utilizar sistemas de detecção quimioluminescentes ou colorimétricos.

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