Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CXCR4 para WB, ELISA - P61073

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CXCR4

• CXCR4 (receptor de quimiocina C-X-C tipo 4, CD184, Fusin) é um receptor acoplado à proteína G (GPCR) que se liga especificamente à quimiocina CXCL12/SDF-1. A ligação do ligante desencadeia a transdução de sinal ao aumentar os níveis de íons de cálcio intracelulares, potenciando a ativação de MAPK1/MAPK3 e inibindo a adenilato ciclase por meio do acoplamento a proteínas Gi. Referências relacionadas: PMID:10074102, PMID:10452968, PMID:10644702, PMID:16725153, PMID:17197449, PMID:18799424, PMID:39093700
• A sinalização do CXCR4 envolve a via AKT e regula a migração celular, desempenhando um papel fundamental na cicatrização de feridas. Referências relacionadas: PMID:24912431, PMID:28978524
• Além do CXCL12, o CXCR4 atua como receptor da ubiquitina extracelular (elevando o cálcio intracelular e reduzindo o cAMP) e do lipopolissacarídeo bacteriano (LPS), mediando a secreção de citocinas inflamatórias (TNF) por monócitos. Referências relacionadas: PMID:20228059, PMID:11276205
• Na infecção viral, o CXCR4 funciona como coreceptor (junto ao CD4) para isolados X4 do vírus da imunodeficiência humana-1 (HIV-1) e como receptor primário para alguns isolados do HIV-2, promovendo a entrada viral. Referências relacionadas: PMID:10074122, PMID:10756055, PMID:8849450
• A localização subcelular é predominantemente na membrana plasmática e nas junções celulares, além de o receptor circular por endossomos iniciais, endossomos tardios e lisossomos.
• As modificações pós-traducionais incluem sulfatação, fosforilação, glicosilação e formação de pontes dissulfeto; também está sujeito à ubiquitinação. O receptor é um proteoglicano.
• O CXCR4 é amplamente expresso, com a isoforma 1 sendo predominante, em tecidos que incluem leucócitos do sangue periférico, baço, timo, medula espinhal, coração, placenta, pulmão, fígado, músculo esquelético, rim, pâncreas, cérebro (cerebelo, córtex cerebral, medula, microglia, astrócitos) e células endoteliais. O splicing alternativo produz variantes adicionais.
• Por analogia, o CXCR4 contribui para a hematopoiese, formação do septo ventricular cardíaco, vascularização do trato gastrointestinal e desenvolvimento de neurônios cerebelares e hipocampais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região intracelular C-terminal (aa 253-352), o que sugere que o anticorpo provavelmente reconhece um epitopo no domínio citoplasmático. Para Western blot, condições desnaturantes e redutoras são recomendadas para expor o epitopo.
• No Western blot, o peso molecular previsto do CXCR4 é de aproximadamente 40 kDa; no entanto, devido à glicosilação e outras modificações pós-traducionais, a banda aparente pode deslocar-se para um peso molecular maior em certos tipos celulares.
• Para aplicações em ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de detecção direcionado a um epitopo extracelular distinto se estiver desenvolvendo um ensaio sanduíche. Sempre valide as condições do ensaio com controles positivos e negativos adequados.
• Como o CXCR4 é expresso em muitas células imunes e endoteliais, bons lisados de controle positivo incluem Jurkat, THP-1 ou PBMCs; para tecido, baço ou timo podem funcionar bem.
• Se estiver estudando a função de coreceptor do HIV, observe que o anticorpo pode não bloquear a entrada viral, pois ele reconhece um epitopo intracelular.

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