Anticorpo Policlonal Anti-CYB5R3 para WB, IF/ICC, ELISA - P00387

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CYB5R3

• A NADH-citocromo b5 redutase 3 (CYB5R3), também conhecida como diaforase-1, é uma enzima flavoproteína (contendo FAD) codificada pelo gene CYB5R3 (DIA1) em humanos.
• A CYB5R3 catalisa a redução de duas moléculas de citocromo b5 usando NADH como doador de elétrons, desempenhando um papel crucial no transporte de elétrons e em reações redox.
• A enzima está envolvida no metabolismo lipídico, incluindo a biossíntese de colesterol e a dessaturação de ácidos graxos, através de sua interação com o citocromo b5.
• A CYB5R3 localiza-se na membrana do retículo endoplasmático, na membrana mitocondrial externa e no citoplasma, refletindo suas funções multifuncionais.
• É expressa nos estágios finais da maturação eritroide, sugerindo uma função importante no metabolismo das células vermelhas do sangue.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, miristoilação e fosforilação, que podem regular sua associação à membrana e sua atividade.
• Mutações na CYB5R3 estão associadas à metemoglobinemia congênita, destacando sua importância clínica.
• A proteína possui um peso molecular calculado de aproximadamente 34 kDa (34235 Da), consistente com a banda observada em western blotting.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 125–334 da CYB5R3 humana (NP_001165131.1), uma região conservada entre as isoformas típicas; verifique a reatividade cruzada em sistemas além de humano, camundongo ou rato, se necessário.
• Em western blotting, espera-se uma banda principal em torno de 34 kDa; o splicing alternativo ou modificações pós-traducionais (PTMs) podem gerar bandas adicionais, portanto, valide no lisado celular ou tecidual relevante.
• Para imunofluorescência/ICC, o anticorpo pode detectar a CYB5R3 no RE e nas mitocôndrias, produzindo um padrão citoplasmático reticular e pontuado; inclua marcadores de organelas para estudos de colocalização.
• Para ELISA, titule o anticorpo e use controles positivos apropriados; o pareamento com um anticorpo de detecção correspondente é recomendado para ensaios do tipo sanduíche.
• Armazene o anticorpo na temperatura recomendada (por exemplo, -20°C) após o recebimento e minimize os ciclos de congelamento e descongelamento para preservar a atividade.

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