Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-CYBA para WB, IF/ICC, ELISA - P13498

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CYBA (p22phox)

• CYBA codifica a proteína p22phox, a cadeia leve do complexo citocromo b-245 (também conhecido como citocromo b(558)), que é uma subunidade essencial do complexo NADPH oxidase de fagócitos. Referências relacionadas: PMID:15824103, PMID:17140397, PMID:38355798

• O complexo NADPH oxidase transfere elétrons do NADPH citosólico para o oxigênio molecular, gerando o ânion superóxido (O2(-)), uma espécie reativa de oxigênio crucial para a defesa do hospedeiro e sinalização celular. Referências relacionadas: PMID:38355798

• p22phox atua como um andaime para a montagem das subunidades regulatórias citosólicas, e sua região C-terminal é fosforilada, permitindo a ligação de NCF1/p47-phox para iniciar a ativação do complexo. Referências relacionadas: PMID:19948736

• CYBA também se associa com NOX3 para formar uma NADPH oxidase constitutivamente ativa que gera superóxido em células não fagocíticas. Referências relacionadas: PMID:15824103, PMID:17140397

• A proteína se localiza na membrana celular e na membrana fagossômica após a ativação.

• CYBA contém hélices transmembrana e liga cofatores de heme e ferro essenciais para a transferência de elétrons.

• Mutações em CYBA estão associadas à doença granulomatosa crônica (DGC), uma imunodeficiência primária caracterizada pela produção defeituosa de superóxido.

• A proteína está sujeita a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 126–195 da CYBA humana, uma região que é conservada entre humano, camundongo e rato, consistente com a reatividade cruzada observada. Para detecção da CYBA endógena, considere validar o anticorpo em linhagens celulares relevantes (ex.: neutrófilos, macrófagos) ou tecidos.
• Para western blot, um peso molecular previsto de 21 kDa é esperado. No entanto, modificações pós-traducionais podem causar pequenos desvios. Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Em aplicações de imunofluorescência, a CYBA se localiza na membrana plasmática, portanto, padrões de coloração de membrana devem ser observados. As condições de permeabilização devem ser otimizadas para o tipo celular alvo.
• Protocolos de ELISA devem ser otimizados com um tampão de revestimento e sistema de detecção adequados, garantindo um bloqueio adequado para reduzir a ligação inespecífica.

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