Anticorpo policlonal de coelho Anti-CYP1B1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q16678

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CYP1B1

• O citocromo P450 1B1 (CYP1B1) é uma monooxigenase hem-tiolato que metaboliza diversos substratos endógenos, incluindo hormônios esteroides, ácidos graxos e vitaminas, usando NADPH e oxigênio molecular.
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• Ele hidroxila seletivamente o 17beta-estradiol na posição C-4, gerando 4-hidroxiestradiol, um metabólito envolvido na carcinogênese hormonal.
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• O CYP1B1 converte o retinol todo-trans em ácido retinóico todo-trans, desempenhando um papel fundamental na sinalização retinóide extra-hepática.
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• Ele epoxida o ácido araquidônico em epoxieicosatrienoicos (EpETrEs), que atuam como mediadores lipídicos no sistema vascular.
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• Além disso, o CYP1B1 exibe atividade desidratase independente de NADPH e O2 frente aos hidroperoxieicosatetraenoatos (HpETEs).
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• Subcelularmente, o CYP1B1 se localiza na membrana do retículo endoplasmático, na fração microssomal e nas mitocôndrias.
• Ele é expresso em uma ampla variedade de tecidos, incluindo coração, cérebro, pulmão, rim e órgãos reprodutivos, e é detectado em células endoteliais retinianas e da veia umbilical.
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• Mutações no gene CYP1B1 estão associadas ao glaucoma congênito primário e à anomalia de Peters, destacando sua importância no desenvolvimento ocular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é composto por proteína de fusão recombinante correspondente à região N-terminal (aminoácidos 1-260) do CYP1B1 humano; leve em consideração que este anticorpo pode reconhecer a proteína de comprimento completo e possíveis isoformas ou fragmentos em lisados.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 61 kDa; recomenda-se a otimização das condições de bloqueio e incubação para diferentes tipos de amostra.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, métodos adequados de fixação e permeabilização devem ser validados para o tipo celular alvo, dada a associação do CYP1B1 a membranas.
• Aplicações em ELISA podem exigir a titulação tanto do antígeno de revestimento quanto do anticorpo de detecção para atingir a relação sinal-ruído ideal.
• A reatividade cruzada com CYP1B1 de camundongo e rato já foi observada; a homologia de sequência suporta o uso nessas espécies, mas é recomendada a validação individual no sistema de amostra relevante.

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