Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CYP27A1 para WB e ELISA - Q02318

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de CYP27A1 (Esterol 26-hidroxilase)

• O gene CYP27A1 codifica uma enzima mitocondrial do tipo citocromo P450, a esterol 26‑hidroxilase, pertencente à família CYP27.
• Ela catalisa a hidroxilação em três etapas do colesterol no grupo metilo terminal, produzindo 27‑hidroxicolesterol, um oxisterol fundamental.
  Referências relacionadas: PMID:12077124, PMID:21411718, PMID:28190002
• Por meio dessa atividade, a CYP27A1 regula a homeostase do colesterol ao iniciar a síntese de ácidos biliares pelas vias clássica e alternativa.
  Referências relacionadas: PMID:11412116, PMID:1708392, PMID:2019602
• Os oxisteróis resultantes atuam como ligandos para os receptores X do fígado (LXRs), modulando a transcrição de genes envolvidos no metabolismo lipídico.
  Referências relacionadas: PMID:12077124, PMID:9660774
• A CYP27A1 também está envolvida no metabolismo do 7‑cetocolesterol na retina, podendo proteger contra danos inflamatórios, e no metabolismo do colestanol no cerebelo, auxiliando na depuração de esteróis através da barreira hematoencefálica.
  Referências relacionadas: PMID:21411718, PMID:28190002
• Além disso, a CYP27A1 pode contribuir para a ativação da vitamina D ao catalisar a 25‑hidroxilação da vitamina D3.
  Referências relacionadas: PMID:15465040
• A proteína se encontra na membrana interna mitocondrial e é detectada na retina neural, no epitélio pigmentar da retina e na substância cinzenta e branca do cerebelo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo da região C-terminal (aa 431‑530); confirme a reatividade do anticorpo contra a CYP27A1 nativa e desnaturada por meio de ensaios paralelos de WB e ELISA.
• Para Western blot, é esperada uma banda de aproximadamente 60 kDa; o uso de lisados enriquecidos em mitocôndrias de tecido hepático ou retiniano pode melhorar a sensibilidade da detecção.
• No ELISA, considere usar um peptídeo sintético ou a CYP27A1 recombinante de comprimento total como antígeno de captura para avaliar a especificidade e a afinidade de ligação.
• A reatividade cruzada com a CYP27A1 de camundongo e rato torna esse anticorpo adequado para estudos translacionais, mas valide a reatividade nas matrizes de amostras específicas da espécie relevante.
• Como a CYP27A1 é uma proteína de membrana de baixa abundância, considere estratégias de imunoprecipitação ou amplificação de sinal para amostras com baixa expressão.

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