Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CYP2D6 para WB, IF-P, ELISA - P10635

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CYP2D6

• O Citocromo P450 2D6 (CYP2D6), também conhecido como debrisoquina 4-hidroxilase, é uma enzima monoxigenase pertencente à superfamília do citocromo P450. É codificado pelo gene CYP2D6, que sofre splicing alternativo para gerar múltiplas isoformas.
• O CYP2D6 catalisa o metabolismo oxidativo de diversos substratos endógenos e exógenos, incluindo ácidos graxos, esteroides, retinoides e numerosos fármacos terapêuticos (por exemplo, antiarrítmicos, antagonistas de adrenoceptores, antidepressivos tricíclicos). Referências relacionadas: PMID:18698000 PMID:19965576 PMID:20972997
• A enzima está localizada principalmente na membrana do retículo endoplasmático e em frações microssomais de células hepáticas, consistente com seu papel central no metabolismo de fase I.
• O CYP2D6 contém um cofator heme-ferro essencial para sua atividade catalítica e é classificado como uma oxidoredutase ligante de metal.
• Metaboliza especificamente endocanabinoides, como a anandamida, produzindo derivados epóxi e hidroxi que podem modular vias de sinalização. Referências relacionadas: PMID:18698000 PMID:21289075
• O CYP2D6 também converte o colesterol em 25-hidroxicolesterol, um regulador fisiológico da homeostase do colesterol celular. Referências relacionadas: PMID:21576599
• Além disso, catalisa a transformação oxidativa do all-trans retinol em all-trans retinal, um precursor para a biossíntese de ácido retinoico. Referências relacionadas: PMID:10681376

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 56 kDa. Use lisados de controle positivos apropriados de tecido hepático humano, de camundongo ou de rato, ou células expressando CYP2D6 para confirmar a especificidade.
• Em experimentos de imunofluorescência em parafina (IF-P), otimize as etapas de recuperação de antígenio e permeabilização para garantir a exposição adequada do alvo localizado na membrana do retículo endoplasmático. A contracoloração com um marcador de RE é recomendada para colocalização.
• Para aplicações de ELISA, considere usar o fragmento de imunógeno CYP2D6 recombinante como padrão quantitativo para gerar curvas de calibração confiáveis.
• Devido a polimorfismos genéticos no CYP2D6, os níveis de expressão podem variar entre indivíduos; é aconselhável validar o anticorpo na matriz de amostra pretendida e considerar informações genotípicas ao interpretar os resultados.
• A fonte de coelho monoclonal garante alta afinidade e reprodutibilidade entre lotes, mas as diluições ideais devem ser determinadas empiricamente para cada ensaio e tipo de amostra.

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