Anticorpo policlonal de coelho Anti-CYP46A1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6A2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da CYP46A1

• A CYP46A1 é uma monooxigenase do citocromo P450 que atua como colesterol 24-hidroxilase, desempenhando um papel fundamental na homeostase do colesterol cerebral ao catalisar a hidroxilação no carbono C-24 da cadeia lateral do colesterol, promovendo assim a eliminação do colesterol dos neurônios. Referências relacionadas: PMID:10377398 PMID:14640697 PMID:18621681
• Além do colesterol, ela hidroxila vários derivados do colesterol e hormônios esteroides, tanto no anel quanto na cadeia lateral, convertendo-os em oxisteróis ativos que participam da sinalização lipídica e da biossíntese. Referências relacionadas: PMID:12077124 PMID:14640697 PMID:28190002
• Atua como epoxidase ao converter o desmosterol em (24S),25-epoxicolesterol, um ligante para os receptores nucleares NR1H2 e NR1H3, que demonstrou promover a neurogênese no cérebro em desenvolvimento. Referências relacionadas: PMID:25017465
• Também pode catalisar o metabolismo oxidativo de xenobióticos como o clotrimazol. Referências relacionadas: PMID:20667828
• Ao promover a eliminação do colesterol, a CYP46A1 pode ativar indiretamente a via do mevalonato e coordenar a síntese de novo colesterol e isoprenoides não esteroidais envolvidos na atividade sináptica e no aprendizado (Por similaridade).
• Se localiza na membrana do retículo endoplasmático, na membrana do microssomo, nas regiões pré e pós-sinápticas e nas projeções dendríticas.
• Sua expressão é específica do cérebro, com níveis mais elevados de mRNA nas zonas da massa cinzenta; a expressão aumenta linearmente com a idade e está ausente no tecido fetal.
• Palavras-chave: Heme, ferro, ligação a metais, monooxigenase, oxidorredutase, metabolismo de esteróis, metabolismo do colesterol, sinapse, transmembrana, splicing alternativo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 24–280, cobrindo uma grande porção N-terminal da proteína; embora essa região seja provavelmente capaz de gerar anticorpos contra a CYP46A1 de comprimento total, é recomendado validar a reatividade no sistema de amostra relevante, especialmente ao detectar possíveis isoformas ou fragmentos.
• Para Western blotting, espera-se uma banda próxima a 57 kDa; considere o uso de gel de SDS-PAGE a 10% e condições de transferência adequadas para essa faixa de peso molecular.
• Na imunofluorescência/ICC, como a CYP46A1 é uma proteína integral de membrana do RE, recomenda-se uma permeabilização suave com detergentes como 0,1% de Triton X‑100; a co-coloração com um marcador de RE pode confirmar a localização.
• Para aplicações em ELISA, titule o anticorpo como reagente de captura ou detecção e otimize usando um controle positivo conhecido (por exemplo, proteína recombinante de CYP46A1 ou lisado de tecido); a reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato suporta o uso em modelos de roedores.

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