Anticorpo monoclonal de coelho Anti-Citoqueratina 1 (KRT1) para WB, IF-P, ELISA - P04264

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Citoqueratina 1 (KRT1)

• A queratina 1 citosólica tipo II (KRT1), também designada como citoqueratina 1 (CK-1) ou citoqueratina de 67 kDa, é uma proteína de filamento intermediário tipo II codificada pelo gene KRT1 em humanos.
• Como componente estrutural dos filamentos intermediários, a KRT1 forma heteropolímeros com queratinas tipo I, fornecendo resistência mecânica e estabilidade aos queratinócitos suprabasais em diferenciação dos epitélios estratificados. Referências relacionadas: PMID:1381288
• Por meio de interações com a integrina beta-1 (ITB1) e o receptor da proteína quinase C ativada 1 (RACK1), a KRT1 pode regular a atividade de quinases como PKC e SRC. Referências relacionadas: PMID:17956333
• Em complexo com a C1QBP, a KRT1 atua como um receptor de alta afinidade para o cininogênio 1 (HMWK), ligando os filamentos intermediários à sinalização celular. Referências relacionadas: PMID:21544310
• Subcelularmente, a KRT1 se localiza tanto no citoplasma quanto na membrana celular, o que é consistente com suas funções estruturais e de receptor.
• A KRT1 é expressa predominantemente na epiderme em diferenciação terminal; a fonte proteica para caracterização costuma ser o prepúcio neonatal.
• Essa queratina sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, metilação e citrulinação, e está associada a distúrbios cutâneos como ictiose e ceratodermia palmoplantar quando sofre mutação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que compreende os aminoácidos 545–644 da região C-terminal da KRT1 humana. Essa região provavelmente fica exposta na superfície dos filamentos montados, tornando o anticorpo adequado para detecção de KRT1 tanto desnaturada quanto nativa em condições apropriadas.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto da KRT1 é de aproximadamente 66 kDa. Inclua agentes redutores e etapas de desnaturação adequadas; valide a detecção nos seus lisados específicos de células ou tecidos, pois a extração de queratinas pode exigir tampões com sal alto ou ureia.
• Em imunofluorescência de seções incluídas em parafina (IF-P), a recuperação de antígeno é essencial. Uma etapa de permeabilização pode melhorar a acessibilidade ao alvo intracelular. Confirme a reatividade com amostras de pele humana, de camundongo ou de rato.
• Para ELISA, pareie esse anticorpo monoclonal com um anticorpo de detecção de queratina tipo I apropriado se estiver desenvolvendo um imunoensaio sanduíche. Faça a titulação dos reagentes de captura e detecção no seu sistema de ensaio.
• Como a reatividade cruzada é observada para humano, camundongo e rato, considere o alinhamento da sequência da região do imunógeno para verificar a conservação do epítopo e use controles específicos por espécie.

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