Anticorpo Policlonal Anti-Citoqueratina 14 (KRT14) para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Citoqueratina 14

• A queratina, citoesquelética tipo I 14 (KRT14), também designada como Citoqueratina-14 (CK-14) e Queratina-14 (K14), é um membro da família de proteínas de filamentos intermediários de queratina tipo I.
• A KRT14 forma heteropolímeros obrigatórios com a queratina tipo II KRT5, contribuindo para a rede de filamentos intermediários de queratina que confere resistência mecânica e integridade estrutural à camada basal da epiderme e outros epitélios estratificados. Referências relacionadas: PMID:11724817 PMID:1694855 PMID:1720261
• O domínio da cauda não helicoidal da KRT14 promove a auto-organização dos filamentos KRT5-KRT14 em grandes feixes e aumenta a resiliência mecânica dos filamentos intermediários de queratina in vitro. Referências relacionadas: PMID:11724817
• Subcelularmente, a KRT14 localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seu papel na manutenção da arquitetura citoesquelética e potenciais funções nucleares.
• A expressão tecidual é proeminente nos queratinócitos basais de epitélios estratificados: detectada no epitélio da córnea, camada epidérmica basal e bainha radicular externa dos folículos pilosos em anágeno, mas ausente nas camadas suprabasais terminalmente diferenciadas, como o estrato córneo.
• Variações genéticas na KRT14 estão associadas a múltiplos distúrbios hereditários de fragilidade cutânea, incluindo epidermólise bolhosa simples, displasia ectodérmica e queratodermia palmoplantar.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e ubiquitinação, e contém domínios de hélice enrolada (coiled-coil) e pontes dissulfeto essenciais para a montagem e estabilidade dos filamentos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 371-470 dentro do domínio da cauda não helicoidal C-terminal; o anticorpo pode reconhecer preferencialmente epítopos nesta região, que são críticos para o agrupamento de filamentos e resiliência mecânica.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima a 52 kDa em lisados de queratinócitos; valide a identificação da banda usando controles positivos (por exemplo, lisado de células HaCaT) e considere que modificações pós-traducionais podem causar pequenas mudanças na migração.
• Em imuno-histoquímica (parafina) e imunofluorescência, espera-se uma forte coloração citoplasmática e nuclear nas células epiteliais basais; cortes de pele, córnea ou mucosa oral são tecidos de controle positivo adequados.
• A reatividade cruzada relatada com humanos, camundongos e ratos sugere epítopos conservados; no entanto, para uso em outras espécies ou aplicações que exijam alta especificidade, recomenda-se o alinhamento de sequência da região do imunógeno.
• Como um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes pode variar; valide cada novo lote em seu sistema de ensaio, especialmente para aplicações quantitativas como ELISA.
• Para ELISA, o imunógeno de peptídeo sintético pode servir como antígeno de revestimento para titulação de anticorpos ou como controle positivo para avaliar a atividade ligada à placa.

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