Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Citoceratina 14 (KRT14) para WB, IHC-P, ELISA - P02533

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Citoceratina 14

• KRT14 é uma proteína de filamento intermediário do tipo I essencial para a estrutura estrutural dos queratinócitos basais. Ela forma heteropolímeros obrigatórios com KRT5, estabelecendo uma rede citoesquelética resiliente que fornece resistência mecânica à epiderme e outros epitélios estratificados. Referências relacionadas: PMID:11724817, PMID:1694855, PMID:1720261

• O domínio da caixa não helicoidal da KRT14 promove a autoassembleia dos filamentos KRT5-KRT14 em grandes feixes, aumentando a resiliência dos filamentos in vitro. Referências relacionadas: PMID:11724817

• A KRT14 é principalmente citoplasmática, mas também pode se localizar no núcleo. É fortemente expressa na camada basal de epitélios estratificados, incluindo a epiderme, o epitélio da córnea e a bainha radicular externa dos folículos pilosos, com expressão diminuída nas camadas suprabasais.

• Modificações pós-traducionais, como fosforilação, formação de ligações dissulfeto e ubiquitinação, podem regular a dinâmica e estabilidade dos filamentos de KRT14.

• Variantes patogênicas em KRT14 estão ligadas a síndromes de fragilidade da pele, como a epidermólise bolhosa simples (EBS) e displasia ectodérmica, destacando seu papel essencial na integridade epitelial.

• A expressão de KRT14 é altamente específica do tecido: está presente nos queratinócitos basais e no cabelo em clube circundante durante o telógeno, mas ausente no estrato córneo e na bainha radicular interna.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange o domínio da haste central da KRT14 humana (aa 264-457); devido à alta homologia, espera-se que o anticorpo apresente reação cruzada com a KRT14 de camundongo e rato, conforme indicado pelo fornecedor. Valide sempre na espécie/tecido relevante.

• Para Western blot, espera-se uma banda em ~52kDa; otimize o carregamento e a diluição do anticorpo para detecção clara em lisados de tecidos ricos em queratinócitos (por exemplo, pele, mucosa oral).

• Para IHC-P, use cortes em parafina embebidos em formalina; a recuperação de antígeno pode ser necessária. A coloração de KRT14 marca as células basais; espere um sinal positivo na camada basal da epiderme e outros epitélios estratificados.

• Em aplicações de ELISA, use a proteína recombinante KRT14 purificada como padrão e valide com amostras positivas/negativas conhecidas.

• Como a KRT14 forma complexos com a KRT5, considere experimentos de co-imunoprecipitação para estudar a montagem de filamentos de queratina.

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