Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-Citoqueratina 9 (KRT9) para WB, IF-P, ELISA - P35527

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Citoqueratina 9 (KRT9)

• A Citoqueratina 9 (KRT9), também conhecida como Queratina-9 (K9) ou CK-9, é uma queratina citoesquelética do tipo I codificada pelo gene KRT9 em humanos.
• Ela atua como componente estrutural dos filamentos intermediários especificamente nos queratinócitos suprabasais da epiderme palmoplantar, se associando a queratinas do tipo II para formar redes de queratina robustas.
• Essas redes de filamentos intermediários de queratina são essenciais para manter a integridade mecânica e a resiliência da pele das palmas das mãos e plantas dos pés, que suportam grande pressão e atrito.
• A expressão de KRT9 é estritamente restrita à epiderme terminalmente diferenciada de palmas e plantas, destacando seu papel especializado nesses locais do corpo sujeitos a alta tensão.
• Mutações em KRT9 estão associadas à queratodermia palmoplantar epidermolítica (EPPK), uma doença de pele autossômica dominante caracterizada pelo espessamento difuso da pele de palmas e plantas.
• A estrutura da proteína apresenta um domínio central em haste de bobina enrolada, típico de proteínas de filamentos intermediários, que facilita a dimerização e a montagem dos filamentos.
• A regulação pós-traducional pode incluir eventos de fosforilação, conforme indicado por estudos proteômicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 150–450 da KRT9 humana, uma região interna. Este projeto permite a detecção da proteína KRT9 total em diversos tipos de amostras.
• Para Western blot (WB), use condições desnaturantes e redutoras, e considere incluir um controle de carga como GAPDH ou β-actina. O peso molecular previsto é de aproximadamente 62 kDa; valide a identidade da banda usando controles positivos (por exemplo, lisado de pele de palma) e negativos apropriados.
• Para imunofluorescência (IF-P), os métodos de fixação e permeabilização devem ser otimizados. Como a KRT9 é um filamento intermediário citoplasmático, a permeabilização é essencial. Inclua uma contramarcação nuclear como DAPI para visualizar a localização celular.
• Para aplicações em ELISA, titule o anticorpo usando KRT9 recombinante ou lisados de células para determinar as diluições de trabalho ideais. O pareamento com um anticorpo de detecção compatível pode melhorar a sensibilidade.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato; no entanto, verifique a especificidade no contexto de espécie e tecido relevante, pois a expressão é limitada à epiderme de palmas e plantas.

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