Anticorpo Policlonal Anti-DAG1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14118

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DAG1

• A Distroglicana 1 (DAG1) é um componente central do complexo distrofina-glicoproteína, conectando a matriz extracelular ao citoesqueleto intracelular. É expressa como um precursor que sofre clivagem autocatalítica em alfa-distroglicana periférica e beta-distroglicana transmembrana.
• O complexo distroglicano participa da deposição de laminina e montagem da matriz extracelular, agrupamento de receptores de acetilcolina na junção neuromuscular, estabilidade sarcolemal, sobrevivência celular, mielinação periférica, migração celular, polarização epitelial e morfogênese de ramificação epitelial.
• A alfa-distroglicana liga proteínas da matriz extracelular que contêm o domínio laminina-G (por exemplo, laminina-1/-2, agrina, perlecano) e media sinalização através das vias PI3K/AKT e Src-quinase, regulando assim sinais apoptóticos e organização sináptica.
• A beta-distroglicana ancora à distrofina (DMD) ou utrofina (UTRN) e organiza a axina ao citoesqueleto de actina, facilitando a sinalização mediada por adesão celular e a polaridade celular.
• Na cartilagem, o DAG1 liga a agrina e regula positivamente o fator de transcrição condrogênico SOX9, regulando positivamente a formação da cartilagem.
  Referências relacionadas: PMID:26290588
• A proteína localiza-se em múltiplos compartimentos: o sarcolema e a membrana pós-sináptica, sítios sinápticos, a membrana basal, espaço extracelular, citoplasma/citoesqueleto e o nucleoplasma.
• O DAG1 atua como um receptor celular hospedeiro para arenavírus do novo mundo classe-C (Lassa, vírus da coriomeningite linfocitária) e para a entrada de Mycobacterium leprae nas células de Schwann.
  Referências relacionadas: PMID:16254364, PMID:17360738, PMID:19324387, PMID:9851927
• Expresso em uma variedade de tecidos fetais e adultos, com localização proeminente na membrana basal da epiderme e expressão em queratinócitos e fibroblastos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 654–749) reside na porção C-terminal da beta-distroglicana; espera-se que o anticorpo reconheça tanto o precursor de comprimento total de ~97 kDa quanto a subunidade beta clivada (~43 kDa) em Western blots desnaturantes/redutores.
• Para Western blotting, valide o padrão de bandas observado em tecidos/linhagens celulares positivos conhecidos (por exemplo, músculo esquelético, cérebro) e considere o uso de lisatos frescos inibidos por proteases para evitar degradação.
• Em imunofluorescência/ICC, é necessária a permeabilização para acessar o epítopo intracelular. A coloração conjunta com marcadores de sarcolema ou membrana basal pode confirmar a localização.
• Para aplicações de ELISA, titule o anticorpo como reagente de captura ou detecção usando fragmentos recombinantes de DAG1 ou lisatos celulares em condições padrão; o desempenho deve ser otimizado no sistema de ensaio do usuário final.
• A reatividade cruzada de espécies foi relatada para humanos, camundongos e ratos; se trabalhar com outras espécies, teste experimentalmente e confirme a homologia da sequência previamente.

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