Anticorpo Policlonais Anti-DAP Quinase 1 (DAPK1) para WB, IHC-P, ELISA - P53355

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DAP Kinase 1 (DAPK1)

• DAPK1 é uma serina/treonina quinase dependente de cálcio/calmodulina que integra múltiplas vias de sinalização celular, regulando a sobrevivência celular, a apoptose e a autofagia.
• Ela regula tanto a morte apoptótica tipo I dependente de caspases quanto a morte celular autofágica tipo II independente de caspases, dependendo do contexto celular.
• DAPK1 fosforila uma ampla gama de substratos — incluindo PIN1, TPM1, STX1A, PRKD1, BECN1, TSC2, RPS6, MYL9 e DAPK3 — modulando a localização nuclear, a dinâmica do citoesqueleto, o tráfego de vesículas e a sinalização metabólica.
• No AVC, DAPK1 atua como um amplificador da sinalização do receptor NMDA, fosforilando GRINB na Ser-1303 para promover o influxo lesivo de Ca2+ e a morte neuronal irreversível.
• A isoforma 2, gerada por splicing alternativo, não induz apoptose, mas promove a formação de bolhas na membrana; ela é expressa no tecido intestinal normal e em carcinomas colorretais.
• A localização subcelular é predominantemente citoplasmática e associada ao citoesqueleto, o que é consistente com seus papéis na remodelação e na sinalização celular.
• A proteína apresenta uma arquitetura multidomínio que inclui um domínio quinase, um domínio de ligação à calmodulina, repetições de anquirina e um domínio de morte, sustentando sua função na regulação da morte celular.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para WB, uma banda específica de aproximadamente 160 kDa é esperada em lisados de amostras humanas, de camundongo ou de rato; confirme a especificidade usando controles positivos e negativos adequados.
• Em IHC-P, otimize a recuperação de antígenos e a diluição do anticorpo; considere os padrões de expressão conhecidos (por exemplo, cérebro, epitélio intestinal) para a validação.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se a determinação empírica da concentração de revestimento e dos parceiros de pareamento.
• Como o imunógeno mapeia para a região C-terminal (aa 1141-1430), verifique a detecção da isoforma 2 nos sistemas experimentais relevantes, se necessário.

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