Anti-DAPK3 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O43293

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DAPK3

• O DAPK3 (Proteína quinase associada à morte 3), também conhecido como ZIPK ou Dlk, é uma serina/treonina quinase que desempenha um papel central na regulação da apoptose, autofagia, transcrição, tradução e dinâmica do citoesqueleto de actina.
• Através da fosforilação das cadeias leves de miosina (MYL12B, MYL9) e da subunidade alvo da fosfatase de miosina (PPP1R12A), o DAPK3 modula a contração do músculo liso e a organização das fibras de tensão de actina em células não musculares.
• A quinase participa tanto das vias de morte celular dependentes de caspase (tipo I) quanto independentes de caspase (tipo II), e sua superexpressão pode impulsionar a apoptose ou a morte celular autofágica, dependendo do contexto celular.
• O DAPK3 localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o núcleo, corpos PML, centrossomos, centrômeros, fuso, corpo intermediário e o citoesqueleto de actina, refletindo seus diversos papéis funcionais.
• Regula positivamente a sinalização canônica Wnt/β-catenina através da interação com NLK e TCF7L2, e aumenta a transcrição mediada pelo receptor de androgênio, ligando-o a vias de desenvolvimento e hormonais.
• Sob estimulação com interferon-gama, o DAPK3 fosforila a proteína ribossomal RPL13A, promovendo sua liberação dos ribossomos e seu engajamento no complexo GAIT para inibir a tradução de transcritos específicos.
• A proteína é amplamente expressa em tecidos, com a isoforma 1 e a isoforma 2 notavelmente presentes no músculo liso da bexiga, e é classificada como um potencial supressor de tumores.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1-100) do DAPK3 humano; portanto, espera-se que o anticorpo reconheça epítopos dentro deste domínio.
• Uma banda em aproximadamente 53 kDa deve ser observada por "Western blotting", consistente com o peso molecular previsto do DAPK3. Verifique a detecção em lisados de linhagens celulares ou tecidos apropriados que expressem o alvo.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P) e imunocitoquímica (IF/ICC), as condições de fixação e recuperação de antígeno podem influenciar a coloração; titule o anticorpo e inclua controles apropriados (por exemplo, amostras com "knockdown" ou "knockout") para confirmar a especificidade.
• Relata-se que o anticorpo reage cruzadamente com o DAPK3 de camundongo e rato, provavelmente devido à conservação da sequência na região do imunogênio; no entanto, os utilizadores devem validar a reatividade em seus sistemas experimentais específicos.
• Como um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade de lote para lote. É aconselhável titular cada novo lote e considerar o uso de peptídeos de bloqueio para ensaios de competição se for suspeita de ligação inespecífica.

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