Anticorpo Policlonal Anti-DARS2 para WB, IHC-P, ELISA - Q6PI48

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DARS2

• O DARS2 codifica a aspartil-tRNA sintetase mitocondrial (AspRS), um membro da família de aminoacil-tRNA sintetases de classe II, crítico para a síntese proteica mitocondrial.
• Catalisa a anexação em duas etapas do aspartato ao tRNA(Asp): primeiro ativando o aspartato com ATP para formar Asp-AMP e, em seguida, transferindo o aspartato para a extremidade aceitadora do tRNA.
• Localiza-se principalmente na matriz mitocondrial e pode associar-se à membrana mitocondrial, refletindo seu papel na tradução mitocondrial.
• Nomes alternativos incluem LBSL, ASPRS, mtAspRS e MT-ASPRS; a proteína é a contraparte mitocondrial do DARS citoplasmático.
• Mutações no DARS2 causam leucoencefalopatia com envolvimento do tronco encefálico e da medula espinhal e elevação de lactato (LBSL), ligando-o à neurodegeneração e à doença de Charcot-Marie-Tooth.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação, fosforilação e ubiquitinação, foram identificadas, potencialmente regulando a atividade ou estabilidade da enzima.
• A proteína também é anotada com estrutura 3D, ligação de ATP e ligação de isopeptídeo, destacando seu mecanismo catalítico conservado.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região C-terminal (aa 406–645), que inclui parte do domínio catalítico; confirme a banda detectada em ~74 kDa no seu tipo de amostra e considere a possibilidade de splicing alternativo ou processamento.
• Para Western blot, otimize a diluição do anticorpo (por exemplo, 1:500–1:2000) e use lisatos enriquecidos em mitocôndrias para aumentar o sinal, dada a localização mitocondrial.
• Em IHC-P, teste as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6,0) e inclua um controle sem primário para avaliar a especificidade.
• Para ELISA, emparelhe com um anticorpo secundário apropriado conjugado à enzima e valide a linearidade usando a proteína recombinante DARS2 como padrão.

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