Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-DBH para WB, IP, IF, IHC-P, ELISA - P09172

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Dopamina Beta-Hidroxilase

• A dopamina beta-hidroxilase (DBH), também conhecida como dopamina beta-monooxigenase, é uma monooxigenase contendo cobre que catalisa a hidroxilação da dopamina em noradrenalina, uma etapa crítica na biossíntese do neurotransmissor catecolamina.
• A enzima está localizada no lúmen de vesículas secretoras, incluindo grânulos cromafins da medula adrenal e vesículas de núcleo denso grande de neurônios simpáticos, e também pode ser secretada no espaço extracelular.
• A DBH existe como uma glicoproteína tetramérica com ligações dissulfeto intermoleculares, contribuindo para sua estabilidade estrutural e função enzimática.
• Ela requer íons de cobre e ascorbato (vitamina C) como cofatores para atividade catalítica total, ligando sua função à homeostase redox e de metais celulares.
• Mutações no gene DBH estão associadas à deficiência de dopamina beta-hidroxilase, uma doença autossômica recessiva rara caracterizada por hipotensão ortostática, ptose e deficiência de noradrenalina.
• A proteína tem um peso molecular previsto de aproximadamente 69 kDa, com extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N.
• A DBH está ancorada às membranas das vesículas secretoras por meio de um segmento transmembrana de âncora de sinal, com a maior parte da proteína, incluindo o domínio catalítico, voltada para o lúmen da vesícula.
• Palavras-chave do UniProt incluem estrutura 3D, biossíntese de catecolaminas, cobre, variante de doença, glicoproteína e secretada, destacando seus papéis multifacetados na neurobiologia e em doenças humanas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 388-617 do DBH humano, uma região prevista para fazer parte do domínio catalítico; portanto, é provável que o anticorpo reconheça a forma madura e ativa da proteína.
• Para Western blotting (WB), considere otimizar a preparação da amostra usando condições redutoras e desnaturantes, e espere uma banda em torno de 69 kDa em lisados celulares ou extratos de tecido adrenal.
• Este anticorpo é adequado para múltiplas aplicações, incluindo imunoprecipitação (IP), imunofluorescência (IF/ICC e IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P); valide as diluições do anticorpo empiricamente no sistema de amostra relevante.
• Dada a reatividade cruzada com DBH de camundongo, o anticorpo pode ser empregado em modelos de camundongo transgênico ou knock-out para confirmar a especificidade; use tecidos de controle positivo e negativo apropriados.
• Para ELISA, considere revestir com proteína DBH recombinante ou usar um formato sanduíche com um par de anticorpos de captura/detecção para melhorar a sensibilidade e a faixa dinâmica.

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