Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DDAH1 para WB, IF/ICC e ELISA - O94760

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DDAH1

• A DDAH1 (Dimetilarginina Dimetilaminohidrolase 1) é uma enzima hidrolase que hidrolisa especificamente a N(G),N(G)-dimetil-L-arginina (ADMA) e a N(G)-monometil-L-arginina (MMA), inibidores endógenos da óxido nítrico sintase (NOS). Esta atividade desempenha um papel crítico na regulação da geração de óxido nítrico (NO).
• O gene DDAH1 sofre splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas que podem exibir expressão tecido-específica ou propriedades regulatórias distintas.
• A DDAH1 é uma proteína ligante de metais que coordena íons de zinco, essenciais para sua atividade catalítica e integridade estrutural.
• As modificações pós-traducionais da DDAH1 incluem acetilação e S-nitrosilação, que podem modular sua função enzimática e localização subcelular em resposta a sinais celulares.
• A DDAH1 é expressa em níveis detectáveis no cérebro, fígado, rim e pâncreas, com menor expressão no músculo esquelético, sugerindo papéis tecido-específicos em processos mediados por NO.
• Palavras-chave do UniProt: Estrutura 3D, Acetilação, Splicing alternativo, Sequenciamento direto de proteínas, Hidrolase, Ligação a metais, Identificação proteômica, Proteoma de referência, S-nitrosilação, Zinco.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 1-285 da DDAH1 humana, correspondendo a uma grande região N-terminal. Este projeto normalmente produz anticorpos com boa especificidade para a proteína alvo.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de 31 kDa. Verifique o tamanho da banda em lisados de controle positivo (ex.: de cérebro, fígado ou rim humano) e considere usar controles de carga apropriados.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, otimize os protocolos de fixação e permeabilização para obter coloração específica e valide com controles negativos.
• A reatividade cruzada com a DDAH1 de camundongo e rato foi observada; no entanto, devido às diferenças de sequência, recomenda-se confirmar o desempenho usando lisados ou cortes de tecido das espécies relevantes.
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização de tampões de revestimento e sistemas de detecção; verifique a faixa linear usando a proteína DDAH1 recombinante como padrão.

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