Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DDB2 para WB, IF/ICC, ELISA - Q92466

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DDB2

• A DDB2 (proteína de ligação a danos no DNA 2) é a subunidade de reconhecimento de substrato do complexo UV-DDB, que detecta lesões no DNA induzidas por UV, incluindo dímeros de pirimidina ciclobutano (CPD), fotoprodutos 6-4 (6-4 PP), sítios apurínicos e pequenos desemparelhamentos. Referências relacionadas: PMID:10882109, PMID:11278856, PMID:11705987

• Como parte do complexo E3 ubiquitina ligase DCX (DDB1-CUL4-X-box) DDB2-CUL4-ROC1, a DDB2 direciona a ubiquitinação das histonas H2A, H3 e H4 nos locais de dano, potencialmente facilitando sua remoção dos nucleossomos para promover o reparo. Referências relacionadas: PMID:12732143, PMID:16473935, PMID:16678110

• A E3 ligase contendo DDB2 também ubiquitina a proteína XPC para aumentar a ligação ao DNA e o NER, e direciona a KAT7/HBO1 para degradação após fosforilação mediada por ATR na resposta a danos no DNA. Referências relacionadas: PMID:15882621, PMID:26572825

• A DDB2 localiza-se predominantemente no núcleo e está associada à cromatina, refletindo seu envolvimento direto nos processos de vigilância genômica e reparo do DNA.

• Expressa ubiquamente, a DDB2 apresenta níveis mais elevados no endotélio corneano, com múltiplas isoformas de splicing alternativo exibindo padrões de distribuição específicos de tecido.

• A DDB2 é classificada sob palavras-chave que incluem reparo de DNA, danos ao DNA e via de conjugação Ubl; mutações na DDB2 estão ligadas ao distúrbio xeroderma pigmentoso (XP) grupo E, que predispõe ao câncer de pele.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange a região N-terminal (aa 1-315) e pode detectar múltiplas isoformas da DDB2; verifique a especificidade da isoforma comparando os tamanhos das bandas no western blot.
• Para WB, espera-se uma banda única de ~48 kDa; inclua controles positivos tratados com UV para monitorar modificações pós-traducionais dependentes de danos.
• Em aplicações de IF/ICC, a coloração nuclear deve ser aparente; a co-localização com marcadores de danos no DNA (por exemplo, γH2AX) pode confirmar o recrutamento para locais de lesão.
• Para ELISA, utilize o imunógeno recombinante como padrão e avalie a reatividade cruzada com lisados de camundongo e rato, dada a reatividade cruzada de espécie confirmada.
• Devido ao envolvimento da DDB2 nas vias de ubiquitinação, considere o uso de inibidores de proteassoma ou inibidores de desubiquitinase para estabilizar formas ubiquitinadas em certas configurações experimentais.

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