Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DDX11 para WB, ELISA - Q96FC9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Helicase de DNA Dependente de ATP DDX11

• A DDX11 é uma helicase de DNA dependente de ATP que desenrola o DNA na direção 5' para 3', exigindo uma cauda mínima de fita simples de 5' (15 nt para flaps, 10 nt para substratos com lacuna) para carregamento e translocação. Pode deslocar regiões de dupla fita de até 100 pb, extensível a 500 pb por RPA ou Ctf18-RFC. Referências relacionadas: PMID:10648783, PMID:21854770, PMID:23797032, PMID:18499658, PMID:22102414
• Ela participa no reparo de quebras de fita dupla de DNA nas forquilhas de replicação, estimula a atividade da endonuclease flap FEN1 para processar fragmentos de Okazaki e associa-se à cromatina em regiões em replicação. Referências relacionadas: PMID:23797032, PMID:18499658, PMID:27477908
• A DDX11 coopera com a TIMELESS para preservar a progressão da forquilha de replicação sob estresse e para regular a coesão das cromátides irmãs e a segregação cromossômica mitótica. Referências relacionadas: PMID:26503245, PMID:17105772, PMID:18499658, PMID:20124417
• Sua função nas forquilhas de replicação é modulada pelo lncRNA DDX11-AS1/CONCR, que aumenta a atividade de ATPase e a ligação ao DNA. Referências relacionadas: PMID:27477908
• A DDX11 contribui para a organização da heterocromatina e ativa a transcrição de rRNA recrutando UBTF e RNA polimerase I para loci de rDNA hipometilados. Referências relacionadas: PMID:21854770, PMID:26089203
• A proteína localiza-se no núcleo, nucléolo, polos do fuso e corpo médio. É altamente expressa no baço, timo, testículo e células de melanoma, mas não em melanócitos normais, e suporta a proliferação de células de melanoma. Referências relacionadas: PMID:23116066, PMID:9013641
• A DDX11 é uma fosfoproteína que coordena clusters ferro-enxofre (4Fe-4S) e contém motivos de ligação a ATP e ácido nucleico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para detecção de DDX11 endógena (~108 kDa) por Western blot, considere usar lisados celulares totais de linhagens celulares de alta expressão (ex.: linhagens de melanoma) e garanta separação adequada em gel para proteínas grandes.
• Valide a especificidade do anticorpo incluindo controles positivos e negativos apropriados, pois anticorpos policlonais podem apresentar variações dependentes do lote.
• No ELISA, o imunógeno recombinante (aminoácidos 1–220 da região N-terminal) pode servir como controle positivo ou antígeno de revestimento; titrar as concentrações de anticorpo para obter relações sinal-ruído ótimas.
• Dada a reatividade do anticorpo com a DDX11 humana, a reatividade cruzada com ortólogos ou isoformas deve ser confirmada experimentalmente se usado em outras espécies.

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