Anticorpo Coelho Anti-DDX3 PolymAb® para WB, IF/ICC, IP, ELISA - O00571

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DDX3

• Helicase de RNA dependente de ATP com ampla especificidade de substrato; pode desenrolar duplexos de DNA/RNA e se liga a estruturas de quadruplexo G de RNA.
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• Regula a transcrição modulando a expressão de CDKN1A dependente de SP1 e reprimindo o promotor de CDH1, requerendo atividade ATPase mas não atividade helicase.
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• Facilita a tradução de mRNAs complexos com UTRs 5' estruturadas; também envolvido na tradução mediada por IRES e na montagem do ribossomo 80S.
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• Atua como sensor de RNA viral na imunidade inata, promovendo a produção de interferon tipo I via vias MAVS/RIG-I e IRF3/IRF7.
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• Participa em respostas ao estresse: promove a montagem de grânulos de estresse via interação com EIF4E e regula a piroptose mediada pelo inflamassoma NLRP3.
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• A clivagem por caspases durante a apoptose inativa o DDX3X, aliviando sua inibição da sinalização apoptótica extrínseca.
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• Ativador alostérico da caseína quinase CSNK1E, aumentando a fosforilação de DVL2 e a sinalização Wnt/β-catenina; também envolvido na segregação cromossômica mitótica.
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• A localização subcelular inclui núcleo, citoplasma, grânulos de estresse, inflamassomas, membrana celular, centrossomo e lamellipodia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 100–200 do DDX3 humano (NP_001347.3). Espera-se que esta região N-terminal gere anticorpos reconhecendo todos os isoformas devido à alta conservação.
• Para Western blotting, espera-se uma banda de ~73 kDa; valide a especificidade usando lisados de nocaute ou knockdown de DDX3.
• Na imunofluorescência, o DDX3 mostra localização dinâmica (núcleo, citoplasma, grânulos de estresse, etc.). Use condições de fixação e permeabilização apropriadas; considere controles positivos como células estressadas para induzir formação de grânulos de estresse.
• Para imunoprecipitação, o anticorpo é validado; garanta compatibilidade com o tampão de lise e inclua controles adequados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; determine concentrações ótimas de revestimento experimentalmente.

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