Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-DDX3X/DDX3Y para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00571/O15523

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de DDX3X/DDX3Y

• DDX3X é uma RNA helicase multifuncional dependente de ATP que desenrola duplas fitas de RNA e DNA, com atividade de ATPase estimulada por vários ácidos nucleicos. Liga-se a estruturas de G-quádruplex de RNA e está envolvida na transcrição, tradução e imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:17357160, PMID:21589879, PMID:31575075, PMID:29222110, PMID:30256975
• DDX3X regula positivamente a transcrição de CDKN1A/WAF1/CIP1 via SP1 e reprime CDH1/E-caderina, enquanto também modula a expressão de MTTP mediada por HNF4A na homeostase lipídica. Referências relacionadas: PMID:16818630, PMID:18264132, PMID:28128295
• Promove a tradução de mRNAs complexos com UTR 5' estruturada, como a ciclina E1, e melhora a montagem do ribossomo 80S independentemente da atividade de ATPase. Referências relacionadas: PMID:20837705, PMID:22872150, PMID:17667941, PMID:18628297, PMID:22323517
• Como sensor de RNA viral, DDX3X desencadeia a produção de interferon tipo I via vias MAVS/RIG-I e TLR7/TLR8, ativando IRF3/IRF7 e NF-κB. Este anticorpo reconhece tanto DDX3X quanto seu homólogo no cromossomo Y, DDX3Y (O15523), que compartilham alta identidade de sequência na região do imunógeno. Referências relacionadas: PMID:20127681, PMID:21170385, PMID:31575075, PMID:33674311, PMID:18583960, PMID:18636090, PMID:19913487, PMID:23478265, PMID:27736973
• DDX3X é necessária para a montagem de grânulos de estresse via interação com EIF4E, promovendo sobrevivência, e também regula a montagem do inflamassoma NLRP3, influenciando a piroptose. Referências relacionadas: PMID:21883093
• Ativa alostericamente a caseína quinase CSNK1E, aumentando a fosforilação de DVL2 e regulando positivamente a sinalização Wnt/β-catenina. Referências relacionadas: PMID:23413191, PMID:29222110
• DDX3X facilita a replicação de vários vírus, incluindo HCV, HIV-1, Zika, Dengue e VEEV, frequentemente interagindo com componentes virais ou modulando a imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:29899501, PMID:21170385, PMID:15507209, PMID:18583960, PMID:21589879
• Localizada no núcleo, citoplasma, grânulos de estresse, centrossomos e lamellipodia; amplamente expressa com altos níveis em testículo, epiderme e fígado. Referências relacionadas: PMID:15294876, PMID:16301996, PMID:16818630

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 100–200) visa uma região conservada de DDX3X e DDX3Y; espera-se que este anticorpo monoclonal detecte ambos os parálogos em amostras de humano, camundongo e rato.
• No Western blot, DDX3X migra em torno de 73 kDa, DDX3Y em torno de 71 kDa, e uma isoforma alternativa potencial em 32 kDa; use marcadores de peso molecular apropriados e verifique no sistema de amostra relevante.
• Para imunoprecipitação, o formato monoclonal de coelho tipicamente fornece alta especificidade; otimize a concentração de anticorpo e as condições de incubação para sua configuração experimental.
• Em IHC-P e IF/ICC, espere coloração nuclear e citoplasmática; a indução de estresse pode causar relocalização para grânulos de estresse. Valide com marcadores de compartimento apropriados e controles.
• Aplicações de ELISA podem ser consideradas para quantificar DDX3X/DDX3Y em lisados ou preparações recombinantes; um formato sanduíche com pares de anticorpos correspondentes pode ser explorado.

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