Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DDX4 para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q9NQI0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DDX4

• DDX4, também conhecido como VASA, é um membro da família de helicases de RNA DEAD-box e funciona como uma provável helicase de RNA dependente de ATP.
• É essencial para a espermatogênese, desempenhando um papel crítico no desenvolvimento e diferenciação de células germinativas (PubMed:10920202, PubMed:21034600).
  Referências relacionadas: PMID:10920202, PMID:21034600
• DDX4 está envolvido no silenciamento de transposons via via piRNA, ajudando a manter a integridade genômica em células germinativas (Por similaridade).
• Participa da biogênese secundária de piRNA, incluindo a produção de piRNA desencadeada por PIWIL2, utilizando sua atividade de helicase para processar pre-piRNAs (Por similaridade).
• A proteína localiza-se no citoplasma e na região perinuclear.
• A expressão é altamente tecido-específica, encontrada apenas em ovário e testículo, e em células germinativas primordiais migratórias.
• DDX4 é regulado por fosforilação e sujeito a splicing alternativo.
• Pertence a uma ampla gama de processos biológicos, incluindo proteína do desenvolvimento, diferenciação, meiose e silenciamento gênico mediado por RNA.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi gerado contra um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 635–724 na extremidade C-terminal do DDX4 humano. Esta região provavelmente é conservada e pode detectar múltiplos isoformas.
• Para Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 79 kDa. Valide com controles positivos apropriados de lisados de testículo ou ovário, usando as espécies relevantes (humano, camundongo, rato).
• Para imunofluorescência (IF-P) e imuno-histoquímica (IHC-P), espere marcação citoplasmática e perinuclear. Use fixação e permeabilização apropriadas e considere recuperação antigênica para IHC-P.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi demonstrada, permitindo o uso nesses organismos modelo. Otimize as diluições do anticorpo e as condições para cada aplicação e espécie.
• Devido à expressão restrita em células germinativas, garanta a especificidade do tecido durante o desenvolvimento do ensaio.
• Este anticorpo policlonal pode ser adequado para detecção baseada em ELISA, mas o desempenho deve ser validado no formato sanduíche ou indireto desejado.

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