Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-DDX4 (VASA) para WB - Q9NQI0

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DDX4

• DDX4 (proteína da caixa DEAD 4), também conhecida como VASA, é um membro da família de helicases de RNA da caixa DEAD, caracterizada pelo motivo conservado Asp-Glu-Ala-Asp (DEAD). Funciona como uma helicase de RNA dependente de ATP essencial para o desenvolvimento de células germinativas (PubMed:10920202, PubMed:21034600). Referências relacionadas: PMID:10920202, PMID:21034600
• Na espermatogênese, o DDX4 é necessário para reprimir elementos transponíveis via via piRNA, mantendo a integridade genômica na linhagem germinativa (Por similaridade). Isso envolve a formação de complexos proteicos piRNA-Piwi e a mediação da metilação de transposons.
• O DDX4 participa da biogênese secundária de piRNA através de um ciclo de amplificação ping-pong em células germinativas masculinas fetais, e sua atividade de helicase permite o processamento de pré-piRNAs em piRNAs maduras (Por similaridade).
• A proteína contém múltiplos domínios: um núcleo de helicase central com atividade de ligação de ATP e hidrolase, e possivelmente repetições. Sofre splicing alternativo, gerando isoformas.
• O DDX4 localiza-se predominantemente no citoplasma, com enriquecimento na região perinuclear (Por similaridade).
• A expressão tecidual é restrita ao ovário e testículo, com expressão em células germinativas primordiais migratórias na crista gonal (Por similaridade).
• As palavras-chave incluem proteína de desenvolvimento, diferenciação, meiose, espermatogênese e silenciamento gênico mediado por RNA, refletindo seus papéis críticos na biologia de células germinativas.
• Há evidências de fosforilação como uma modificação pós-traducional (da palavra-chave UniProt Fosfoproteína).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 635–724 próximos ao terminal C do DDX4 humano (NP_077726.1). Esta região é provavelmente específica para o DDX4 humano, mas a reatividade cruzada com camundongo e rato foi confirmada. Ao avaliar a especificidade, considere o alinhamento de sequência entre espécies.
• Este anticorpo monoclonal de coelho é adequado para múltiplas aplicações: Western blot (WB) detectando uma banda em ~79 kDa, imunoprecipitação (IP), imunofluorescência em tecidos embebidos em parafina (IF-P), imuno-histoquímica em secções de parafina (IHC-P) e ELISA. Como com qualquer anticorpo, recomenda-se a otimização da diluição e das condições.
• Para estudos envolvendo expressão específica de células germinativas, o anticorpo pode ser testado usando lisados ou secções de tecido ovariano ou testicular. Dada a expressão restrita, controles negativos apropriados devem ser incluídos.

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