Anticorpo Policlonais Anti-DDX46 para WB, IHC-P, ELISA - Q7L014

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DDX46

• DDX46 (proteína 46 da caixa DEAD, também conhecida como PRP5/PRPF5) é uma RNA helicase provavelmente dependente de ATP e membro da família de proteínas da caixa DEAD, caracterizada por motivos conservados envolvidos na ligação de ATP e desenrolamento do RNA. Referências relacionadas: PMID:12234937, PMID:32494006, PMID:34822310
• É um componente central do complexo 17S U2 pequeno ribonucleoproteína nuclear (snRNP) do spliceossomo, a grande máquina macromolecular que remove íntrons dos pré-mRNAs. Referências relacionadas: PMID:12234937, PMID:32494006, PMID:34822310
• Dentro do snRNP 17S U2, o DDX46 participa diretamente da montagem inicial do spliceossomo e medeia o reconhecimento do sítio de ramificação do íntron, promovendo a seleção da adenosina do sítio de ramificação que atua como nucleófilo para a primeira etapa catalítica do splicing. Referências relacionadas: PMID:32494006, PMID:34822310
• DDX46 é essencial para a montagem do pré-spliceossomo e a verificação do sítio de ramificação, garantindo um splicing preciso e eficiente. Referências relacionadas: PMID:34822310
• Estudos de localização subcelular indicam que o DDX46 está presente em manchas nucleares, nucleoplasma e corpos de Cajal, o que é consistente com seu papel no processamento de pré-mRNA e na dinâmica spliceossomal.
• As modificações pós-traducionais do DDX46 incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação, como sugerido por dados de proteômica de alto rendimento.
• A proteína tem um peso molecular calculado de aproximadamente 117 kDa e contém um domínio de ligação a ATP, um núcleo de helicase e uma região de coil-coil C-terminal, que provavelmente medeia interações proteicas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno cobre a região C-terminal (aa 682–1031), o anticorpo pode detectar o DDX46 de comprimento completo e possivelmente variantes truncadas que não possuem essa região. Recomenda-se verificar a reatividade no seu sistema de amostra específico.
• DDX46 tem um peso molecular previsto de ~117 kDa. Para Western blotting, use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, géis Tris-glicina ou Bis-Tris de 6–8%) e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Para imuno-histoquímica, a localização nuclear do DDX46 sugere que os métodos de permeabilização e recuperação de antígeno podem ser críticos. Valide a coloração em controles de tecido relevantes e considere a contrastain nuclear.
• O anticorpo foi validado para amostras humanas, de camundongo e rato. O alinhamento de sequência de ortólogos de DDX46 pode ajudar a prever a reatividade com outras espécies e guiar o desenho experimental entre espécies.

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