Anticorpo Policlonais Anti-DDX5 (p68) para WB, IHC-P, ELISA - P17844

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DDX5

• A DDX5, também conhecida como p68, é membro da família de proteínas DEAD box e atua como uma RNA helicase provavelmente dependente de ATP.
• Ela desempenha papel no splicing alternativo do pré-mRNA, como o aumento da inclusão do exon 10 da tau de maneira dependente de RBM4, e sua atividade helicase é estimulada por RNA de fita simples.
• A DDX5 atua como um coregulador transcricional: coativa o receptor androgênico (AR), o MYOD1 (envolvido na diferenciação do músculo esquelético), o TP53 (em resposta a danos no DNA) e o RUNX2 (diferenciação de osteoblastos), e também pode reprimir a transcrição por associação com desacetilases de histonas.
• Como parte de um grande complexo PER, a DDX5 está envolvida na regulação do ritmo circadiano ao inibir a terminação transcricional 3' de genes do relógio como PER1 e NR1D1.
• A proteína se localiza predominantemente no núcleo, incluindo nucléolos e speckles nucleares, mas também pode ser encontrada no citoplasma.
• As modificações pós-tradução incluem acetilação, fosforilação, ligação isopeptídica (conjugação com Ubl) e outras modificações que podem regular sua atividade.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que cobre a sequência completa da DDX5 humana (aminoácidos 1-614). Esse desenho pode proporcionar um reconhecimento amplo de epitopos, mas a reatividade cruzada com outros membros da família DEAD box deve ser considerada e validada no sistema de amostras relevante.
• Para Western blotting, o peso molecular esperado da DDX5 é de aproximadamente 69 kDa; uma banda nesse tamanho deve ser observada em amostras positivas. Os níveis endógenos podem variar entre linhas celulares e tecidos.
• Na imuno-histoquímica (seções emblocadas em parafina), as condições de recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo devem ser otimizadas para tipos específicos de tecido, pois a localização é predominantemente nuclear, mas também pode ser citoplasmática.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com outro anticorpo anti-DDX5 pode ser necessário para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato está confirmada, tornando o produto adequado para estudos em modelos de roedores. No entanto, recomenda-se o alinhamento de sequências e testes preliminares para confirmar a reatividade.

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