Anticorpo Policlonais Anti-DDX5 para WB, ELISA - P17844

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DDX5

• DDX5, também conhecido como RNA helicase p68, é um membro da família de proteínas DEAD box, caracterizado por atividade de RNA helicase dependente de ATP, essencial para a modulação da estrutura secundária do RNA.
• Atua no splicing alternativo do pré-mRNA: sua atividade helicase promove a inclusão do éxon 10 da tau de maneira dependente de RBM4, ao se ligar à região da alça de haste downstream do éxon 10.
• Funciona como coativador transcricional para múltiplos fatores de transcrição, incluindo o receptor androgênico (AR), MYOD1 (sinergizando com DDX17 e RNA SRA1), p53/TP53 (envolvido na resposta ao dano de DNA e apoptose) e RUNX2 (regulando a diferenciação de osteoblastos).
• Além disso, pode atuar como repressor transcricional de maneira promotor-específica, provavelmente através da associação com histonas desacetilases, como a HDAC1.
• Como componente do complexo PER, o DDX5 inibe a terminação transcricional 3' de genes alvo circadianos (ex: PER1, NR1D1), contribuindo para a regulação do ritmo circadiano.
• A localização subcelular é principalmente nuclear, incluindo nucléolo e corpúsculos nucleares, mas também é detectado no citoplasma.
• Está sujeito a diversas modificações pós-traducionais: acetilação, fosforilação e ubiquitinação (conjugação Ubl), que podem regular sua atividade e interações.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), espera-se uma banda específica em aproximadamente 69 kDa. Utilize condições padrão de SDS-PAGE e transferência, e considere a validação com lisados de knockdown de DDX5 ou controles de proteína recombinante.
• O imunógeno cobre a sequência N-terminal de 1-614 aminoácidos; portanto, o anticorpo pode reconhecer o DDX5 de comprimento completo e possíveis isoformas. Verifique a especificidade no seu sistema experimental.
• A reatividade cruzada com camundongo permite estudos translacionais entre espécies; valide em tecidos ou linhagens celulares de camundongo relevantes para confirmar a reatividade.
• Para ELISA, otimize as concentrações de revestimento e os métodos de detecção; o anticorpo pode ser utilizado para verificações de título ou ensaios de captura de antígeno.
• Dado os papéis do DDX5 no splicing e na transcrição, aplicações funcionais como imunoprecipitação de RNA (RIP) ou co-imunoprecipitação (Co-IP) podem ser consideradas, mas recomenda-se testes empíricos.
• Como anticorpo policlonal, monitore a consistência entre lotes incluindo controles positivos e negativos em cada experimento.

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