Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DEFB4A (Beta-defensina 2) para WB, IF-P, ELISA - O15263

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de DEFB4A (Beta-defensina 2)

• DEFB4A, também conhecida como beta-defensina 2 (BD-2, hBD-2), SAP1, DEFB2, DEFB4, DEFB102, é um membro da família das beta-defensinas de peptídeos antimicrobianos.
• Exibe atividade antimicrobiana contra bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, com maior atividade contra bactérias Gram-negativas (PubMed:10837369, PubMed:9202117). Referências relacionadas: PMID:10837369, PMID:9202117
• Sua atividade antimicrobiana contra P. aeruginosa é sensível ao sal e reduzida em altas concentrações de sal acima de 25 mM (PubMed:10837369). Referências relacionadas: PMID:10837369
• Também exibe atividade antifúngica contra C. albicans, permeabilizando as membranas celulares ao alvejar o lipídio fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) da membrana plasmática (PubMed:30050988, PubMed:10837369, PubMed:9202117). Referências relacionadas: PMID:30050988, PMID:10837369, PMID:9202117
• Atua como ligante para o receptor de quimiocina C-C CCR6, induzindo quimiotaxia de células dendríticas imaturas e células T de memória (PubMed:10521347, PubMed:20068036). Referências relacionadas: PMID:10521347, PMID:20068036
• DEFB4A é uma proteína secretada, detectável no fluido do revestimento epitelial e nos espaços extracelulares.
• Expressa predominantemente em células epiteliais pulmonares, prepúcio, pulmão e traqueia, com menor expressão em rim, útero e glândula salivar (PubMed:10837369, PubMed:9202117, PubMed:9831658). Referências relacionadas: PMID:10837369, PMID:9202117, PMID:9831658
• Contém resíduos de cisteína conservados que formam pontes dissulfeto intramoleculares, uma característica das defensinas, que contribuem para a estabilidade estrutural e a função antimicrobiana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1-64 da DEFB4A humana, que cobre a região N-terminal incluindo o peptídeo sinal. Considere que o anticorpo pode reconhecer as formas precursoras e/ou maduras; recomenda-se a validação em sistemas biológicos relevantes.
• Para Western blot (WB), devido ao pequeno peso molecular de ~7 kDa, use um gel de poliacrilamida de alta porcentagem (ex: 15% ou gel de gradiente) e otimize cuidadosamente as condições de transferência para evitar transferência excessiva. Controles positivos podem incluir lisados de células epiteliais pulmonares ou traqueais humanas.
• Em imunofluorescência em seções embebidas em parafina (IF-P), espere padrões de coloração extracelular ou vesicular, pois DEFB4A é uma proteína secretada. A permeabilização pode ser ajustada; inclua controles apropriados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para detecção de DEFB4A nativa ou recombinante em fluidos biológicos como lavagem bronco alveolar ou sobrenadantes de cultura celular. O pareamento com um anticorpo de captura pode ser explorado para o desenvolvimento de ELISA sandwich.
• Este anticorpo é reativo com DEFB4A humana; a reatividade cruzada com outras espécies ou membros da família das defensinas não foi testada de acordo com os dados disponíveis. Valide a especificidade no seu sistema de amostras.

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