Anticorpo policlonal anti-DENND4A para WB e ELISA - Q7Z401

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da DENND4A

• A DENND4A, também conhecida como proteína de ligação ao promotor de C-myc (MYCPBP) e IRLB, é uma proteína contendo um domínio DENN que atua como fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) e regulador da transcrição.
• Pode ativar a RAB10 ao promover a troca de GDP por GTP, convertendo assim as proteínas Rab inativas ligadas a GDP em seu estado ativo ligado a GTP.
• Liga-se ao elemento semelhante ao ISRE (elemento de resposta estimulado por interferon) do promotor MYC P2, podendo regular a expressão de MYC. Referências relacionadas: PMID:8056341
• A localização subcelular é principalmente nuclear, de acordo com seu papel na regulação transcricional.
• É expressa ubiquitariamente, com níveis mais altos na medula óssea, intermediários nos linfócitos do sangue periférico e mais baixos no baço. Nos tecidos cerebral, mamário e prostático, a expressão é maior em células normais do que em células tumorais.
• A expressão é regulada de maneira dependente do crescimento e do ciclo celular, sugerindo envolvimento no controle da proliferação.
• A proteína sofre splicing alternativo e fosforilação, acrescentando camadas de regulação funcional.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto da DENND4A é de aproximadamente 209 kDa. Considere utilizar um gel de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 6-8%) e tempo de transferência suficiente para garantir a transferência eficiente de proteínas de alto peso molecular.
• Por se tratar de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser validada. Inclua controles positivos e negativos apropriados em seus experimentos para confirmar a especificidade.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1500-1650 da DENND4A humana (NP_005839.3). Para experimentos com amostras de camundongo, verifique a homologia da sequência na região-alvo.
• Para aplicações de ELISA, as concentrações ideais de revestimento e as condições de detecção devem ser determinadas empiricamente.
• Considerando a localização nuclear da DENND4A, avalie o uso de lisados enriquecidos em núcleo para melhorar a detecção em WB.

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