Anticorpo monoclonal anti-Desmogleína 3/PVA para WB, IHC-P, ELISA - P32926

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Desmogleína-3

• Identificada como o antígeno de 130 kDa do pênfigo vulgar (PVA), a DSG3 é membro da família das caderinas. É expressa predominantemente nas camadas basal e espinhosa da epiderme, na bainha radicular externa dos folículos pilosos e nos epitélios das mucosas (esôfago, cavidade oral, língua, tonsila) (PubMed:19717567, PubMed:9701552, PubMed:24220297, PubMed:16740002). Referências relacionadas: PMID:19717567, PMID:9701552, PMID:24220297, PMID:16740002
• A DSG3 é um componente central das junções desmossômicas e é necessária para a adesão célula-célula dependente de Ca²⁺, particularmente em queratinócitos submetidos a estresse mecânico (PubMed:31835537). Referências relacionadas: PMID:31835537
• É essencial para ancorar o clava pilosa telógena à bainha radicular externa do folículo, garantindo assim a fixação da haste capilar durante a fase de repouso (PubMed:9701552). Referências relacionadas: PMID:9701552
• A DSG3 mantém a integridade da barreira epitelial ao promover a adesão mediada por desmossomos das células suprabasais às células basais e ao estabilizar as proteínas de placa DSP, JUP, PKP1, PKP2 e PKP3 (PubMed:22294297). Referências relacionadas: PMID:22294297
• A proteína participa da mecanotransdução ao facilitar a localização de YAP1 na membrana plasmática em resposta à tensão mecânica, envolvendo um complexo com PKP1 e YWHAG, podendo assim influenciar a transcrição e a proliferação impulsionadas por YAP1 (PubMed:31835537). Também organiza a F-actina cortical e ancora a actina às junções estreitas por meio de RAC1 para regular a contratilidade (PubMed:22796473). Referências relacionadas: PMID:31835537, PMID:22796473
• No citoplasma, a DSG3 apoia a localização da E-caderina (CDH1) e da β-catenina (CTNNB1) nas junções aderentes em desenvolvimento, potencialmente por meio da modulação da atividade de SRC (PubMed:22294297). Além disso, suprime a migração de queratinócitos por meio da inibição de p38MAPK, sugerindo um papel na modulação da cicatrização de feridas (PubMed:26763450). Referências relacionadas: PMID:22294297, PMID:26763450
• Subcelularmente, a DSG3 localiza-se na membrana celular, nos desmossomos, nas junções estreitas e no citoplasma. É uma glicoproteína transmembrana com repetições extracelulares de caderina, propriedades de ligação ao cálcio e peso molecular previsto de aproximadamente 107,5 kDa.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (a.a. 50–615) abrange a maior parte do domínio extracelular e pode permitir a detecção da DSG3 de comprimento completo tanto em condições desnaturantes (WB) quanto nativas (IHC-P).
• Para WB, espera-se uma banda de aproximadamente 108 kDa; confirme a especificidade usando linhagens celulares positivas para DSG3 (por exemplo, A-431, HaCaT) ou lisados de tecidos da pele ou mucosa.
• Em IHC-P, pode ser necessária a recuperação antigênica; antecipe uma marcação nas membranas celulares e nos desmossomos em epitélios estratificados, como pele, esôfago ou tonsila.
• Para ELISA, recomenda-se otimizar as condições de revestimento e detecção; o anticorpo pode ser testado como reagente de captura ou de detecção.
• A reatividade cruzada foi confirmada para humanos; a reatividade com outras espécies ainda não foi determinada e deve ser validada no sistema experimental relevante.
• Como a DSG3 é um autoantígeno importante no pênfigo vulgar, este anticorpo pode auxiliar no desenvolvimento de ensaios diagnósticos ou em modelos de pesquisa de doenças autoimunes.

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