Anticorpo Policlonal Anti-Desmoplaquina para WB, IHC-P, ELISA - P15924

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Desmoplaquina

• A Desmoplaquina (nomes alt. DP, DCWHKTA) é um componente principal das junções célula-célula dos desmossomas, obrigatória em todos os desmossomas, e regula positivamente a adesão celular (PubMed:25733715). Referências relacionadas: PMID:25733715
• Ancora filamentos intermediários à placa desmossômica e organiza a rede de queratina, essencial para a integridade da barreira epitelial epidérmica e dérmica (PubMed:26604139). Referências relacionadas: PMID:26604139
• A Desmoplaquina promove a comunicação intracelular de junções gap ao facilitar o tráfego mediado por microtúbulos de GJA1/CX43 para membranas celulares via interação com MAPRE1/EB1 (PubMed:25225338). Referências relacionadas: PMID:25225338
• A proteína regula negativamente a progressão do ciclo celular e a diferenciação em queratinócitos, potencialmente ao inibir as vias MAPK e PI3K (PubMed:17475244). Referências relacionadas: PMID:17475244
• A Desmoplaquina interage com o signalossoma COP9, promovendo a diferenciação de queratinócitos através da denedulação do EGFR e redução da localização na membrana (PubMed:28891468). Referências relacionadas: PMID:28891468
• É necessária para manter a abundância proteica de múltiplos componentes do desmossoma, incluindo DSG1, DSG2, DSC2, DSC3 e plakofilinas (PubMed:17475244, PubMed:26073755). Referências relacionadas: PMID:17475244 PMID:26073755
• O domínio C-terminal liga-se ao DNA do telómero e interage com TRF2 para prevenir danos no telómero e manter o comprimento do telómero (PubMed:31595153). Referências relacionadas: PMID:31595153
• A Desmoplaquina é expressa em tecidos de origem estratificada, incluindo queratinócitos da pele, mucosa oral, coração e músculo eretor do pelo, e localiza-se em desmossomas, membrana celular, citoplasma e núcleo.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 2609-2830) da Desmoplaquina humana, que contém um domínio de repetição de plakina envolvido na ligação a filamentos intermediários e interação com DNA telomérico. Anticorpos que visam esta região podem reconhecer a Desmoplaquina de comprimento total e quaisquer fragmentos C-terminais.
• Para Western blot, espere uma banda próxima do peso molecular previsto de ~332 kDa. Dado o grande tamanho, considere usar géis de SDS-PAGE de 6-8% e transferência húmida com tempos de transferência prolongados (por exemplo, durante a noite a 30 V). Valide a especificidade da banda usando controlos apropriados.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação de antigénio (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0) e a permeabilização do tecido são recomendadas. Teste em tecidos com desmossomas abundantes, como pele ou coração, e confirme a localização nas junções célula-célula.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser usado para detetar proteína Desmoplaquina recombinante ou purificada. Otimize as condições de revestimento e deteção com base no formato do antigénio.
• A reatividade cruzada relatada com espécies humana, de rato e de rato deve ser confirmada experimentalmente no seu sistema de ensaio específico, uma vez que a homologia de sequência pode afetar a ligação.
• Dada a localização subcelular dinâmica da Desmoplaquina (desmossomas, citoplasma, núcleo), considere fracionamento subcelular ou coloração conjunta com marcadores juncionais para verificar a especificidade do anticorpo.

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