Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-DHX9/RNA Helicase A para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q08211

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DHX9

• DHX9, também conhecido como RNA Helicase A, é uma helicase de ácido nucleico multifuncional dependente de ATP que desenrola tanto DNA quanto RNA na direção 3' para 5', participando na replicação do DNA, transcrição, processamento de RNA, tradução e silenciamento gênico. Referências relacionadas: PMID:11416126, PMID:12711669, PMID:15355351

• DHX9 desenrola diversos substratos de ácido nucleico, incluindo dsDNA, dsRNA, híbridos DNA:RNA, D-loops, R-loops, G-quádruplexes e DNA triplex, exigindo uma cauda simples de 3' para iniciação. Referências relacionadas: PMID:20669935, PMID:21561811, PMID:24049074

• Como membro da família de helicases DEAH box, DHX9 atua como um coativador transcricional, ligando a RNA polimerase II e fatores de transcrição como BRCA1, CREBBP, RELA e SMN1, e se liga ao promotor CDKN2A. Referências relacionadas: PMID:11038348, PMID:11149922, PMID:11416126

• Na regulação pós-transcricional, DHX9 promote o splicing alternativo, estabiliza o mRNA MYC via complexo CRD e aumenta a tradução de mRNAs específicos através da ligação ao UTR 5'. Referências relacionadas: PMID:11402034, PMID:16680162, PMID:28221134, PMID:19029303, PMID:22190748

• DHX9 localiza-se predominantemente no núcleo (nucleoplasma, nucléolo), mas também se desloca para o citoplasma e associa-se ao citoesqueleto e ao centrossomo sob condições específicas.

• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e ubiquitinação, modulam a atividade e as interações do DHX9.

• Em infecções virais, DHX9 atua como um sensor citosólico de ácidos nucleicos virais e aumenta a transcrição, splicing e tradução do HIV-1 ao se ligar ao RNA TAR e outros elementos virais. Referências relacionadas: PMID:20696886, PMID:21957149, PMID:11096080, PMID:9892698, PMID:25149208

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente à região C-terminal (aa 1100–1200) do DHX9 humano; verifique se o anticorpo reconhece o DHX9 endógeno no peso molecular esperado de ~141 kDa no seu sistema de amostra.
• Para Western blotting, devido ao alto peso molecular do DHX9, use um gel de acrilamida de baixa porcentagem (ex.: 6–8%) e garanta condições de transferência adequadas; inclua controles de carga apropriados.
• Este anticorpo é relatado como reagente com DHX9 humano, de camundongo e rato; no entanto, os níveis de expressão variam entre tecidos e linhagens celulares, portanto, otimize a preparação da amostra e a diluição do anticorpo para cada aplicação.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação antigênica por calor em tampão citrato (pH 6.0) é recomendada, e use um sistema de detecção sensível; valide a especificidade da coloração com controles apropriados.
• O anticorpo é adequado para imunoprecipitação (IP) e ELISA; considere usar o peptídeo imunógeno como controle positivo e valide o desempenho do anticorpo na sua configuração experimental específica.

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