Anticorpo policlonal anti-DKC1 para IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60832

Especificações e parâmetros essenciais do produto

Contexto biológico: função e localização da DKC1

• O gene DKC1 codifica a disquerina, a subunidade catalítica do complexo de ribonucleoproteínas nucleolares pequenas H/ACA (snoRNP), responsável pela pseudouridilação do rRNA. Ele isomeriza a uridina de modo que a ribose se ligue ao C5 em vez do N1, introduzindo resíduos de pseudouridina que estabilizam a conformação do rRNA. Referências relacionadas: PMID:25219674 PMID:32554502
• É essencial para a biogênese dos ribossomos e, por meio do processamento correto e do transporte intranuclear do TERC (o componente de RNA da telomerase), é necessária para a manutenção dos telômeros. Referências relacionadas: PMID:19179534
• Também promove a adesão célula a célula e célula-substrato, aumenta a taxa de proliferação celular e induz a hiperexpressão de citoqueratina.
• Localiza-se predominantemente no nucléolo e nos corpos de Cajal dentro do núcleo, com alguma presença no citoplasma.
• É expressa de forma ubíqua nos tecidos humanos, refletindo seu papel constitutivo na modificação do rRNA.
• Está sujeita a várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e conjugação semelhante à ubiquitina, que podem regular sua atividade ou estabilidade.
• Variantes genéticas em DKC1 estão associadas à disqueratose congênita ligada ao X, caracterizada por falência da medula óssea, predisposição ao câncer e características como distrofia ungueal e leucoplasia oral; mutações também podem causar a síndrome de Hoyeraal-Hreidarsson.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 245–514 da DKC1 humana (NP_001354.1), cobrindo a região central até a região C-terminal. Considere essa sequência ao projetar reagentes de detecção complementares ou realizar o mapeamento de epítopos.
• Para IHC-P, como a DKC1 é expressa de forma ubíqua, mas enriquecida nos nucléolos, otimize a recuperação antigênica e valide a coloração em tecidos de controle positivo, como testículo ou linhagens celulares proliferativas. Inclua controles negativos (por exemplo, amostras com DKC1 depletada) para confirmar a especificidade.
• As aplicações de IF/ICC devem revelar a localização nos nucléolos e corpos de Cajal. Utilize métodos apropriados de fixação/permeabilização e faça dupla coloração com um marcador nucleolar (por exemplo, fibrilarina) para verificar o padrão esperado.
• O ELISA pode exigir uma otimização cuidadosa das condições de revestimento e detecção devido ao tamanho relativamente grande da proteína. A reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato deve ser verificada experimentalmente ao utilizar amostras dessas espécies.

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