Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-DKK3 para WB/IF/ICC/ELISA - Q9UBP4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Proteína DKK3

• A DKK3 (Proteína Relacionada a Dickkopf 3), também conhecida como REIC ou RIG, é uma glicoproteína secretada pertencente à família Dickkopf de antagonistas de Wnt. Ela contém um peptídeo sinal, dois domínios ricos em cisteína e regiões coiled-coil.
• A DKK3 antagoniza a sinalização canônica de Wnt/β-catenina ao se ligar aos co-receptores LRP5/6 e promover sua internalização via proteínas transmembrana KREMEN, inibindo assim a interação ligante-receptor de Wnt.
• Esta proteína desempenha papéis críticos no desenvolvimento embrionário, incluindo a padronização do eixo anteroposterior, morfogênese dos membros, somitogênese e formação dos olhos, através da modulação local da atividade de Wnt.
• Em tecidos adultos, a DKK3 está implicada na homeostase óssea, supressão tumoral (frequentemente regulada negativamente em cânceres) e processos neurodegenerativos como a doença de Alzheimer, embora estas últimas funções sejam inferidas por similaridade.
• A localização subcelular é exclusivamente extracelular: a DKK3 é secretada no espaço extracelular e não parece estar associada à membrana ou ser intracelular.
• A expressão é mais alta no coração, cérebro e medula espinhal, com níveis mais baixos em outros tecidos, sugerindo funções regulatórias específicas de tecido.
• Modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação e formação de pontes dissulfeto, típicas de proteínas secretadas do tipo "cysteine-knot", que podem afetar sua estabilidade e atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 200–350 do DKK3 humano, cobrindo a região C-terminal rica em motivos coiled-coil. Esta região pode detectar a DKK3 de comprimento total e potencialmente alguns produtos de clivagem; verifique o peso molecular em seu sistema.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 38 kDa (calculado a partir da sequência de aminoácidos). A glicosilação pode fazer com que a banda observada migre ligeiramente mais alto. Use controles apropriados.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), como a DKK3 é uma proteína secretada, incluir um agente bloqueador do Golgi (ex.: BFA) pode melhorar a coloração intracelular se a retenção for desejada; caso contrário, considere analisar a DKK3 secretada em sobrenadantes celulares via ELISA.
• O anticorpo é testado para aplicações de ELISA; pode ser usado para captura ou detecção de antígeno dependendo do formato do ensaio. Realize testes de reatividade cruzada com sua matriz específica.
• Apesar da reatividade cruzada relatada com camundongo e rato, a homologia de sequência na região do imunógeno é alta; ainda assim, valide a reatividade em tecidos específicos da espécie.
• Sempre faça titulação do anticorpo em suas condições de ensaio para obter a melhor relação sinal-ruído.

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