Anticorpo Policlonal Anti-DLC1 para WB e ELISA - Q96QB1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DLC1

• O DLC1 é uma proteína ativadora de GTPases Rho (RhoGAP) que inativa especificamente as pequenas GTPases RHOA, RHOB, RHOC e CDC42, terminando assim as suas cascatas de sinalização a jusante.
• Desempenha um papel crítico na reorganização do citoesqueleto, migração e proliferação celular, sendo reconhecido como um supressor de tumores em múltiplos tipos de cancro.
• Além da sua atividade RhoGAP, o DLC1 funciona como um ativador da fosfolipase PLCD1.
• Durante a migração de células epiteliais induzida por fatores de crescimento, o DLC1 forma complexos com TNS3 e PTEN; após estimulação, a fosforilação desencadeia uma troca onde o PTEN se liga ao DLC1 e o TNS3 se liga ao p85, levando à ativação de RHOA na parte posterior da célula e ativação de RAC1 na borda frontal. Referências relacionadas: PMID:26166433
• O DLC1 localiza-se no citoplasma, nas adesões focais e na membrana celular, consistente com os seus papéis na adesão e migração celular.
• A proteína é mais altamente expressa no baço, com níveis mais baixos na próstata, testículo, ovário, intestino delgado e cólon; está ausente no timo.
• O DLC1 contém um domínio START (transferência de lipídios relacionada a StAR), refletido no seu nome alternativo STARD12, que pode mediar interações com lipídios ou esteróis.
• O gene sofre splicing alternativo e usa promotores alternativos, gerando múltiplas variantes de transcrição.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 204–463, uma região a montante do domínio característico RhoGAP; este design pode fornecer especificidade para isoformas do DLC1 sem interferir com a deteção da atividade GAP.
• Para Western blotting, este anticorpo deteta uma banda em torno do peso molecular previsto de 171 kDa; considere incluir controlos positivos de lisados celulares humanos, de camundongo ou de rato conhecidos por expressarem DLC1 (por exemplo, linhas derivadas do baço), dada a reatividade cruzada relatada.
• Em aplicações de ELISA, otimize as condições de revestimento com antigénio usando DLC1 recombinante de comprimento total ou o fragmento imunogénico e verifique a linearidade da deteção com diluições em série da proteína padrão.
• Dado que o DLC1 funciona na adesão focal e migração, as condições de fixação e permeabilização para imunocitoquímica devem ser cuidadosamente otimizadas para preservar a localização nativa; note que este anticorpo não foi validado para ICC/IHC nas especificações do produto.

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