Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DNA Ligase III/LIG3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49916

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNA Ligase III

• A DNA ligase 3 (LIG3) existe como múltiplos isoformas: isoforma 3 (nuclear) e isoforma 1 (mitocondrial), com nomes alternativos incluindo LIG2, LIG3alfa e MTDPS20.
• A isoforma 3 (nuclear) forma um heterodímero com XRCC1 e participa no reparo de quebras na fita de DNA e na correção de troca de cromátides irmãs após danos por radiação ionizante e agentes alquilantes. Referências relacionadas: PMID:10207110 | PMID:24674627
• A isoforma 1 (mitocondrial) funciona como uma DNA ligase no reparo por excisão de base mitocondrial (mtBER), crucial para manter a integridade do genoma mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:10207110 | PMID:24674627
• A localização subcelular é tanto nuclear quanto mitocondrial, consistente com suas funções duplas na manutenção do DNA genômico e mitocondrial.
• Expressa predominantemente em testículo, timo, próstata e coração, refletindo tecidos com alta demanda metabólica ou proliferativa.
• Contém um domínio de ligação a ATP, dois motivos de dedo de zinco e requer magnésio como cofator para sua atividade de ligase dependente de ATP.
• Mutações no gene estão associadas à síndrome de depleção de DNA mitocondrial 20 (MTDPS20), uma doença mitocondrial primária, destacando sua função mitocondrial essencial.
• Envolvida em processos celulares mais amplos, incluindo replicação de DNA, recombinação e progressão do ciclo celular, ligando o reparo de DNA à estabilidade do genoma.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 254–460, uma região conservada entre as isoformas nuclear e mitocondrial; portanto, o anticorpo pode reconhecer ambas as formas.
• Para Western blotting, espere uma banda dominante próxima a 113 kDa; inclua controles positivos apropriados (ex.: lisado de HeLa, HEK293 ou testículo) e valide no sistema de amostra relevante.
• Em IHC-P, considere métodos de recuperação de antígeno e padrões de expressão específicos do tecido; testículo, timo, próstata e coração são tecidos positivos adequados.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato permite aplicação em organismos modelo comuns; no entanto, verifique a reatividade específica da espécie em sua configuração experimental.
• A natureza policlonal pode oferecer sinal robusto, mas a consistência entre lotes deve ser avaliada para ensaios quantitativos.
• Para ELISA e IF/ICC, otimize a diluição do anticorpo primário e as condições de detecção usando controles positivos e negativos conhecidos.

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