Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DNA Ligase III/LIG3 para WB, IP, ELISA - P49916

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNA Ligase III

• DNA ligase 3 (LIG3), também conhecida como DNA ligase III ou polideoxyribonucleotídeo sintase [ATP] 3, é uma DNA ligase dependente de ATP, essencial para o reparo e recombinação do DNA.
• A isoforma 3 funciona como um heterodímero com XRCC1 no núcleo, corrigindo reparo defeituoso de quebras de fita de DNA e troca de cromátides irmãs após tratamento com radiação ionizante ou agentes alquilantes. Referências relacionadas: PMID:10207110 PMID:24674627
• A isoforma 1 se localiza nas mitocôndrias, onde atua como a DNA ligase no reparo mitocondrial de excisão de bases. Referências relacionadas: PMID:10207110 PMID:24674627
• A proteína contém um domínio de ligação a ATP, um motivo de dedo de zinco e um núcleo catalítico conservado, permitindo sua atividade de ligase de forma dependente de ATP e magnésio.
• A expressão de LIG3 é detectada em testículo, timo, próstata e coração, refletindo papéis específicos por tecido na manutenção do DNA.
• A localização subcelular inclui tanto o núcleo quanto a mitocôndria, mediada por iniciação alternativa e um peptídeo de trânsito mitocondrial na isoforma 1.
• Modificações pós-traducionais como a fosforilação regulam a atividade de LIG3, e mutações estão ligadas a doenças mitocondriais primárias.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto é 113 kDa. Use escadas de proteína adequadas e condições redutoras; considere a validação em lisados de células humanas ou de camundongo.
• Na imunoprecipitação, otimize a concentração do anticorpo e as condições de lavagem para capturar complexos endógenos de LIG3, observando sua interação com XRCC1 em extratos nucleares.
• Aplicações em ELISA podem utilizar o anticorpo para detecção direta ou indireta; certifique-se que o antígeno de revestimento corresponde à região do imunógeno (aminoácidos 730-1009).
• Como se trata de um anticorpo policlonal, ele pode reconhecer múltiplas isoformas; verifique a especificidade com controles adequados ou linhas celulares com knockout se a discriminação de isoformas for necessária.

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