Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DNA Ligase IV para WB, IHC-P, ELISA - P49917

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da DNA Ligase IV

• A DNA ligase 4 (LIG4), também conhecida como DNA ligase IV ou polidesoxirribonucleotídeo sintase [ATP] 4, é codificada pelo gene LIG4 e é membro da família de DNA ligases dependentes de ATP.
• A LIG4 catalisa a etapa final de ligação na junção de extremidades não homólogas (NHEJ), uma via essencial para o reparo de quebras de dupla fita do DNA (DSBs) e para a recombinação V(D)J durante o desenvolvimento imunológico. Referências relacionadas: PMID:12517771, PMID:17290226, PMID:23523427, PMID:9242410
• A LIG4 forma um subcomplexo estável com a proteína estrutural XRCC4, que estimula significativamente sua atividade de ligação; o complexo LIG4-XRCC4 pode selar quebras de fita simples e, com menor eficiência, unir extremidades que apresentam microhomologia de 2 nucleotídeos ou lacunas de 1 nucleotídeo. Referências relacionadas: PMID:17290226, PMID:9242410, PMID:9809069
• O carregamento eficiente do complexo LIG4-XRCC4 nas quebras do DNA requer a montagem do holoenzima da proteína quinase dependente de DNA (DNA-PK) no local do dano. Referências relacionadas: PMID:10854421
• A LIG4 também regula o acúmulo nuclear da XRCC4, destacando uma interação dinâmica que localiza a maquinaria de NHEJ nos locais de dano ao DNA. Referências relacionadas: PMID:24984242
• A proteína é predominantemente nuclear, em consonância com sua função no reparo do DNA genômico, e é expressa em níveis mais elevados nos testículos, timo, próstata e coração.
• Com uma massa molecular prevista de aproximadamente 104 kDa, a LIG4 contém motivos conservados para ligação de ATP, coordenação de magnésio/metais e repetições BRCT em tandem que mediam interações proteína–proteína em complexos de reparo do DNA.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo é um fragmento recombinante que abrange os aminoácidos 1–210 da LIG4 humana (NP_002303.2); ao planejar os experimentos, considere que essa região N-terminal pode ser conservada entre as espécies, sustentando a reatividade cruzada observada.
• As aplicações validadas incluem western blotting (WB), imuno-histoquímica em cortes incluídos em parafina (IHC-P) e ELISA; para WB, o peso molecular previsto é de aproximadamente 104 kDa — valide sempre a detecção no lisado celular ou tecidual relevante.
• A reatividade cruzada foi relatada para humano, camundongo e rato; para experimentos com outras espécies, avalie a homologia da sequência da região do imunógeno e inclua controles apropriados para confirmar a especificidade.

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