Anticorpo Policlonal Anti-DNA-PKcs para WB, IHC-P, ELISA - P78527

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DNA-PKcs

• Serina/treonina proteína quinase que atua como um sensor molecular de danos ao DNA, essencial para a junção de extremidades não homólogas (NHEJ) de DNA necessária para o reparo de quebras de fita dupla (DSB) e recombinação V(D)J. A atividade catalítica requer ligação ao DNA. Referências relacionadas: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Recrutada por XRCC5/XRCC6 para as extremidades do DNA, protegendo e alinhando as extremidades quebradas, impedindo a degradação e isolando a DSB para reparo por NHEJ. Atua como um andaime para a localização de proteínas de reparo do DNA. Referências relacionadas: PMID:11955432, PMID:12649176, PMID:14734805
• Fosforila substratos-chave na resposta a danos ao DNA, incluindo H2AX ('Ser-139'), p53/TP53, c-Abl/ABL1 e artemis (DCLRE1C), modulando suas funções. Referências relacionadas: PMID:14627815, PMID:16046194, PMID:10026262, PMID:10467406, PMID:11889123
• Envolvido na modulação da transcrição e biogênese de ribossomos: promove o processamento do rRNA precursor em rRNA 18S maduro dentro do processossomo da subunidade menor via ligação ao snoRNA U3. Referências relacionadas: PMID:32103174
• Contribui para a regulação do ritmo circadiano antagonizando a fosforilação de CRY1 e aumentando a estabilidade da proteína CRY1, provavelmente através de um mecanismo indireto. (Por similaridade)
• Regula a resposta imune inata através da via cGAS-STING montando o complexo HDP-RNP e fosforilando CGAS, prejudicando sua oligomerização. Referências relacionadas: PMID:28712728, PMID:33273464
• Localiza-se principalmente no núcleo, nucléolo e citosol. Encontrado nas extremidades dos cromossomos, sugerindo um papel na manutenção dos telômeros.
• Palavras-chave: dano ao DNA, reparo de DNA, ligação a DNA, quinase, serina/treonina proteína quinase, núcleo, imunidade inata, variante da doença (IMD26).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região terminal C (a.a. 3993-4128) do DNA-PKcs humano; verifique o reconhecimento da proteína de comprimento total nos sistemas de amostra relevantes.
• Para Western blot, devido ao alto peso molecular (469 kDa), considere o uso de géis de SDS-PAGE de baixa porcentagem (por exemplo, 6% ou gradiente) e tempos de transferência estendidos. Confirme a especificidade com controles apropriados.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), otimize as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato pH 6,0 ou Tris-EDTA pH 9,0) e teste múltiplas concentrações para reduzir o fundo.
• Em aplicações de ELISA, valide a reatividade do anticorpo com o imunógeno ou proteína nativa sob várias condições de revestimento.
• A reatividade cruzada é relatada para humano; teste a reatividade com outras espécies se necessário, pois pode existir homologia de sequência.

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