Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-DNA Polymerase Delta Subunidade 4 (POLD4/p12) para WB, ELISA - Q9HCU8

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da subunidade 4 da DNA polimerase delta (POLD4)

• A subunidade 4 da DNA polimerase delta (POLD4), também conhecida como p12 ou POLDS, é um componente do complexo tetramérico da DNA polimerase delta (Pol-delta4). Este complexo desempenha um papel central na replicação e reparo de alta fidelidade do DNA genômico. Referências relacionadas: PMID:16510448, PMID:19074196, PMID:20334433
• Dentro do Pol-delta4, a POLD4 aumenta a taxa de síntese do DNA enquanto diminui a fidelidade, regulando a atividade da polimerase e a exonucleasse de revisão 3' para 5' da subunidade catalítica POLD1. Referências relacionadas: PMID:16510448, PMID:19074196, PMID:20334433
• A POLD4 participa da maturação dos fragmentos de Okazaki durante a síntese do DNA da fita atrasada, facilitando tanto a via de clivagem de flap curto quanto um sistema de tradução de nick. Referências relacionadas: PMID:24035200
• Sob estresse de replicação do DNA, a POLD4 é necessária para o reparo de forks de replicação quebrados via replicação induzida por quebra (BIR), um mecanismo que pode gerar duplicações genômicas segmentares de até 200 kb. Referências relacionadas: PMID:24310611
• A POLD4 está envolvida na síntese translesão (TLS) através de lesões no DNA como O6-metilguanina e sítios abásicos, permitindo que a replicação contorne certos tipos de dano. Referências relacionadas: PMID:19074196
• Em resposta ao dano do DNA, a POLD4 é direcionada para degradação, um processo crítico para a inibição da progressão do fork e a promoção da sobrevivência celular. Essa degradação é provavelmente mediada por ubiquitinação. Referências relacionadas: PMID:24022480
• A POLD4 está localizada no núcleo, o que é consistente com suas funções essenciais na replicação e reparo do DNA.
• A POLD4 é caracterizada por palavras-chave incluindo splicing alternativo, dano ao DNA, reparo do DNA, replicação do DNA e conjugação Ubl, refletindo seu papel multifacetado na manutenção da estabilidade genômica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo é uma proteína recombinante que cobre os aminoácidos 1–107 da POLD4 humana, que representa a proteína de comprimento total. Espera-se que esse design gere anticorpos que reconheçam a conformação nativa da POLD4.
• Para análise por Western blot (WB), use uma linha celular humana conhecida por expressar POLD4; o peso molecular previsto é de aproximadamente 12 kDa. Lembre-se que modificações pós-traducionais ou formação de complexos proteicos podem causar pequenos desvios na migração.
• Como anticorpo policlonado de coelho, este reagente provavelmente se liga a múltiplos epítopos, fornecendo sinal robusto mesmo na presença de pequenas variações de sequência. No entanto, a reatividade cruzada com ortólogos de outras espécies deve ser determinada empiricamente.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado em formatos direto, indireto ou sanduíche. As diluições de trabalho ideais e as condições do ensaio devem ser otimizadas pelo usuário final.
• Como a POLD4 funciona como parte de um complexo multi-subunidade, considere realizar co-imunoprecipitação ou eletroforese em gel nativo para estudar suas interações com outros componentes da polimerase delta.

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