Anticorpo policlonal de coelho anti-DNAJA1 [Validado por KO] para WB, IF/ICC, ELISA - P31689

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da DNAJA1

• A DNAJA1, também conhecida como HDJ2 ou proteína 4 de choque térmico de 40 kDa, é membro da família de chaperonas DnaJ/Hsp40. Ela funciona como uma co-chaperona da HSPA8/Hsc70, estimulando sua atividade de hidrólise de ATP (PubMed:10816573). Referências relacionadas: PMID:10816573
• Em seu papel como co-chaperona, a DNAJA1 está envolvida no transporte de proteínas para as mitocôndrias e auxilia no dobramento e na translocação de proteínas mitocondriais.
• A DNAJA1 regula negativamente a translocação da proteína pró-apoptótica BAX do citosol para as mitocôndrias, protegendo as células contra a apoptose em condições de estresse (PubMed:14752510). Referências relacionadas: PMID:14752510
• Por outro lado, a DNAJA1 também pode promover a apoptose em resposta a estresses celulares específicos, como a exposição à anisomicina ou à radiação UV, destacando seu papel dual nas decisões sobre o destino celular (PubMed:24512202). Referências relacionadas: PMID:24512202
• A DNAJA1 está localizada em vários compartimentos subcelulares, incluindo o citoplasma, o núcleo, as mitocôndrias, o retículo endoplasmático (microssoma) e a membrana, de acordo com suas diversas funções de chaperona.
• A proteína sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e prenilação, e contém domínios conservados de dedos de zinco que mediam interações com proteínas clientes.
• A isoforma 2 da DNAJA1, gerada por splicing alternativo, apresenta expressão específica de tecido, com níveis elevados nos testículos e nos pulmões, enquanto a isoforma 1 é expressa ubiquamente.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno foi uma proteína de fusão recombinante que abrangia os aminoácidos 178–397 da DNAJA1 humana (NP_001530.1). Essa região inclui o domínio C-terminal e pode contribuir para o reconhecimento de ambas as isoformas; recomenda-se a validação em sistemas de amostras relevantes.
• Para Western blot (WB), o peso molecular observado é de aproximadamente 45 kDa. Utilize controles apropriados, incluindo a validação por knockout, se possível, para confirmar a especificidade.
• Nas aplicações de imunofluorescência (IF/ICC) e ELISA, otimize a diluição do anticorpo e as condições de fixação/permeabilização com base na localização subcelular do alvo (citoplasmática, nuclear, mitocondrial).
• Como a expressão da DNAJA1 pode sofrer alterações em condições de estresse, considere utilizar amostras de controle positivo tratadas com choque térmico ou anisomicina para verificar a reatividade.

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