Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-DNMT1 para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P26358

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNMT1

• A DNMT1, também conhecida como DNA metiltransferase HsaI, MCMT ou CXXC9, é uma proteína nuclear de ~183 kDa que atua como a principal DNA metiltransferase de manutenção em humanos.
• Preferencialmente metila dinucleotídeos CpG hemimetilados e associa-se a focos de replicação de DNA durante a fase S para copiar fielmente os padrões de metilação para a fita recém-sintetizada, garantindo a herança epigenética. Referências relacionadas: PMID:17200670, PMID:21745816, PMID:26070743
• Durante as fases G2 e M, a DNMT1 permanece associada à cromatina para sustentar a metilação independentemente da replicação, preservando assim as marcas de metilação genômica ao longo do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:21745816
• A DNMT1 também medeia a repressão transcricional através da ligação direta à HDAC2 e pode coordenar a metilação do DNA com modificações de histonas, como a dimetilação H3K9, em conjunto com a DNMT3B e a CTCFL. Referências relacionadas: PMID:10888872, PMID:18413740
• Forma um complexo corepressor que facilita a hipemetilação induzida por KRAS e o silenciamento de genes supressores de tumores no câncer colorretal, e da mesma forma mantém a repressão de genes de desenvolvimento em células-tronco embrionárias. Referências relacionadas: PMID:24623306
• Expressa ubiquamente com os níveis mais altos em tecidos fetais, coração, rim e placenta; a isoforma 2 é menos abundante. Localiza-se no núcleo e nos cromossomos e contém domínios de dedo de zinco CXXC característicos (Palavras-chave: splicing alternativo, dedo de zinco).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um fragmento terminal N (aa 1-124) da DNMT1; portanto, espera-se que reconheça a DNMT1 de comprimento total e possivelmente produtos de truncamento terminal N.
• Ao realizar western blot, use um gel SDS-PAGE de 6-8% e garanta uma transferência eficiente devido ao grande tamanho da DNMT1 (~183 kDa).
• Para imuno-histoquímica e imunofluorescência, pode ser necessária a permeabilização nuclear; considere validar a especificidade da coloração com controles de knockdown ou knockout da DNMT1.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com a DNMT1 de camundongo e rato, mas os usuários devem verificar o desempenho em cada espécie e tipo de tecido, dada a expressão ubíqua, mas variável.
• Como um anticorpo policlonal, pode apresentar variabilidade entre lotes; inclua um controle de carregamento e padrões de referência internos para ensaios quantitativos.

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