Anticorpo policlonal anti-DNMT3B para WB, IHC-P, ELISA - Q9UBC3

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da DNMT3B

• DNMT3B (DNA (citosina-5)-metiltransferase 3B) é uma enzima essencial para a metilação de novo do DNA em todo o genoma, sendo indispensável para o estabelecimento dos padrões de metilação durante o desenvolvimento inicial.
• Metila preferencialmente o DNA nucleossômico dentro da região central e pode atuar como um correpressor transcricional ao interagir com CBX4 e ZHX1, independentemente de sua atividade de metiltransferase.
• Em um complexo com DNMT1 e o fator de transcrição CTCFL/BORIS, a DNMT3B ativa a expressão do gene BAG1 por meio da modulação da dimetilação da histona H3 em K4 e K9.
• Necessária para o silenciamento de DUX4 em células somáticas (PubMed:27153398). Referências relacionadas: PMID:27153398
• O splicing alternativo gera várias isoformas; as isoformas 4 e 5 não possuem motivos críticos de metiltransferase e provavelmente não são funcionais.
• A DNMT3B é exclusivamente nuclear e expressa ubiquamente, com níveis mais elevados no fígado fetal, coração, rim e placenta. A isoforma 1 está ausente no cérebro, músculo esquelético e PBMC, enquanto a isoforma 5 é específica dos testículos.
• A proteína contém domínios de dedos de zinco, sofre fosforilação e citrulinação e desempenha funções no silenciamento gênico e em doenças (por exemplo, síndrome de ICF).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido contra uma proteína recombinante correspondente à região N-terminal (aa 1-100) da DNMT3B humana. Essa região está presente na maioria das isoformas; no entanto, confirme a detecção de todas as variantes esperadas em sua amostra.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 96 kDa. Use extratos nucleares ou lisados de células inteiras de tecidos com alta expressão de DNMT3B (por exemplo, fígado fetal ou placenta) para uma detecção ideal.
• Foi relatado que este anticorpo apresenta reação cruzada com camundongo e rato; valide o desempenho na espécie e aplicação relevantes.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere realizar testes em cortes de tecido fetal, onde a DNMT3B é abundante. As condições de recuperação antigênica podem exigir otimização.
• As aplicações de ELISA devem incluir controles negativos e positivos apropriados para garantir a especificidade.

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