Anticorpo Policlonel de Coelho Anti-DNMT3B para WB, IF/ICC, ELISA - Q9UBC3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da DNMT3B

• Codifica a DNA (citosina-5)-metiltransferase 3B (DNMT3B), também conhecida como DNA metiltransferase HsaIIIB (M.HsaIIIB), com múltiplas isoformas; as isoformas 4 e 5 não possuem motivos conservados de metiltransferase e provavelmente não são funcionais.
• Essencial para a metilação de novo do DNA em todo o genoma durante o desenvolvimento, estabelecendo padrões de metilação coordenados com a metilação de histonas (Por similaridade).
• Metila preferencialmente o DNA nucleossômico dentro da região do núcleo do nucleossomo e pode atuar como um corepressor transcricional ao se associar a CBX4 ou ZHX1 independentemente de sua atividade catalítica (Por similaridade).
• Necessário para o silenciamento de DUX4 em células somáticas, destacando seu papel na repressão gênica (PubMed:27153398). Referências relacionadas: PMID:27153398
• Subcelularmente, está localizada no núcleo, o que é consistente com sua função na modificação da cromatina.
• É expressa de forma ubíqua com os níveis mais altos no fígado fetal, coração, rim e placenta; isoformas específicas apresentam padrões teciduais restritos (por exemplo, a isoforma 5 é específica de testículo).
• Modificada pós-tradução por fosforilação, citrulinação e ubiquitinação; contém domínios de dedo de zinco e é uma metiltransferase dependente de S-adenosil-L-metionina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 345-475 da DNMT3B humana, uma região dentro do domínio catalítico de metiltransferase; isso sugere que o anticorpo pode reconhecer tanto isoformas de comprimento completo quanto truncadas que retêm essa região.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto da isoforma canônica é de 96 kDa, mas outras isoformas e modificações pós-tradução podem produzir bandas adicionais; considere usar extratos nucleares de tecidos/linhagens celulares humanas, de camundongo ou rato.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), é esperada coloração nuclear; valide com contrastains nucleares e controles apropriados em sistemas celulares relevantes.
• Para ELISA, realize titulação padrão e verificação de especificidade usando o imunógeno recombinante ou a proteína de comprimento completo como controle positivo.
• Devido à natureza policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada com controles positivos e negativos apropriados na aplicação pretendida.

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