Anticorpo Policlonar de Coelho Anti-DNMT3L para WB, IHC-P, ELISA - Q9UJW3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do DNMT3L

• DNMT3L é um fator regulador cataliticamente inativo das DNA metiltransferases que pode tanto promover quanto inibir a metilação do DNA dependendo do contexto.
• Essencial para a função de DNMT3A e DNMT3B: ativa DNMT3A e DNMT3B ligando-se ao seu domínio catalítico (PubMed:17687327). Referências relacionadas: PMID:17687327
• Acelera a ligação do DNA e da S-adenosil-L-metionina (AdoMet) às metiltransferases e se dissocia do complexo após a ligação do DNA (PubMed:17687327). Referências relacionadas: PMID:17687327
• DNMT3L reconhece a lisina 4 da histona H3 não metilada (H3K4me0) e induz a metilação de novo do DNA por recrutamento ou ativação de DNMT3 (PubMed:17687327). Referências relacionadas: PMID:17687327
• Em células germinativas, DNMT3L é necessário para a metilação de locais imprintados juntamente com DNMT3A, e em células germinativas masculinas, ele metila especificamente retrotransposons para evitar sua mobilização.
• Em células-tronco embrionárias, DNMT3L tanto promove a metilação do DNA de genes housekeeping quanto inibe a metilação em promotores de genes bivalentes ao interagir com o componente EZH2 do complexo PRC2/EED-EZH2, impedindo o recrutamento de DNMT3A/B.
• DNMT3L promove a diferenciação de ESCs em células germinativas primordiais ao inibir a metilação do DNA no promotor RHOX5, ativando assim sua expressão.
• Subcelularmente, DNMT3L se localiza predominantemente no núcleo, consistente com seu papel na modificação da cromatina.
• É expresso em níveis baixos em vários tecidos, incluindo testículo, ovário e timo, e pertence à família das proteínas de dedo de zinco, apresentando motivos de ligação a metais.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Considere realizar o fracionamento nuclear para enriquecer DNMT3L para detecção por Western blot, já que ele se localiza no núcleo.
• Para IHC-P, a recuperação de antígeno pode ser necessária; valide em tecidos com baixa expressão conhecida, como testículo ou ovário.
• A sequência do imunógeno é conservada entre humano, camundongo e rato; a reatividade cruzada é prevista, mas deve ser confirmada experimentalmente.
• O anticorpo detecta uma banda em torno de 44 kDa; recomenda-se o uso de uma escada de proteínas pré-colorida para estimativa precisa do tamanho.
• O bloqueio por peptídeo com o imunógeno pode servir como controle de especificidade para os ensaios de WB e IHC-P.

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