Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-DOG-1/TMEM16A para WB, ELISA - Q5XXA6

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de DOG-1/TMEM16A

• O gene ANO1 codifica a anoctamina-1, um canal de cloreto ativado por cálcio (CaCC) que desempenha papéis centrais no transporte transepitelial de ânions e na contração do músculo liso. Referências relacionadas: PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• O canal é indispensável para a atividade marcapasso das células intersticiais de Cajal (ICCs) no trato gastrointestinal, regulando assim a motilidade intestinal.
• Em células epiteliais das vias aéreas, a ANO1 contribui substancialmente para a condutância de cloreto basal e estimulada, sendo fundamental para o desenvolvimento da cartilagem traqueal.
• Ela facilita a ativação e a expressão na membrana do CFTR ao aumentar a liberação de reservatórios de Ca²⁺ do retículo endoplasmático, destacando seu papel no transporte de cloreto relacionado à fibrose cística. Referências relacionadas: PMID:28963502
• A ANO1 regula a expressão de muco nas vias aéreas induzida pelas interleucinas IL3 e IL8 por meio da proteína associada à asma CLCA1, regulando positivamente a MUC5AC; no entanto, evidências conflitantes indicam que a expressão de MUC5AC pode não exigir a ANO1 em certos contextos. Referências relacionadas: PMID:33026825, PMID:31732694
• O splicing alternativo gera isoformas com distintas sensibilidades ao cálcio e permeabilidades ao cloreto, incluindo uma variante epitelial da glândula sudorípara com permeabilidade basal aumentada a Cl⁻ e uma isoforma hipersensível.
• A proteína se localiza predominantemente na membrana plasmática apical e nos compartimentos pré-sinápticos, com expressão tecidual ampla que inclui fígado, músculo esquelético, músculo liso gastrointestinal, ductos coletores renais, epitélio nasal e glândulas sudoríparas écrinas.
• Modificações pós-traducionais, como glicosilação, formação de pontes dissulfeto e fosforilação, são críticas para o tráfego e a regulação funcional da anoctamina-1.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para western blotting, espera-se uma banda de aproximadamente 114 kDa em condições redutoras e desnaturantes; valide usando lisados de controle positivo de tecidos humanos ou de camundongo conhecidos por expressarem ANO1, como músculo liso gastrointestinal ou epitélio das vias aéreas.
• O imunógeno (aa 40–210) corresponde à região N-terminal; a detecção de certas isoformas de splicing pode variar, portanto verifique o reconhecimento específico da isoforma, se necessário.
• Ao realizar ELISA, titule o anticorpo para determinar as concentrações de trabalho ideais e confirme a especificidade contra a proteína ANO1 recombinante ou lisados de células com superexpressão.
• Como anticorpo policlonal, variabilidade entre lotes é possível; inclua controles adequados e considere a absorção cruzada se forem observadas bandas não específicas.
• A reatividade cruzada é verificada para humano e camundongo; para outras espécies, realize o alinhamento de sequência da região do imunógeno e testes piloto.

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