Anticorpo monoclonal de coelho anti-Doublecortina para WB, ELISA - O43602

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Doublecortina

• A Doublecortina (DCX), também conhecida como Doublin, Lis-X ou LISX, é uma proteína associada aos microtúbulos, essencial para a migração neuronal e a laminação do córtex durante o desenvolvimento cerebral.
• Atua nas etapas iniciais da dispersão neuronal e pode competir com a proteína cinase DCLK1 pela ligação ao alvo, participando potencialmente numa via de sinalização dependente de cálcio.
• A DCX coopera com a PAFAH1B1/LIS-1 em vias sobrepostas, mas distintas, que promovem a migração neuronal adequada.
• A proteína localiza-se no citoplasma e nas projeções neuronais, em conformidade com o seu papel na migração neuronal.
• A DCX é altamente expressa nas regiões cerebrais fetais (placa cortical, zonas intermédia e ventricular) e no lobo frontal adulto, apresentando expressão baixa ou ausente noutros tecidos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação (conjugação de UBL), que podem regular a sua função e estabilidade.
• Variantes genéticas na DCX estão associadas a perturbações do desenvolvimento, como lisencefalia e epilepsia, frequentemente envolvendo rearranjos cromossómicos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Com base no desenho do imunógeno, que abrange os aminoácidos 265–365, é provável que o anticorpo reconheça um epítopo na região C-terminal da Doublecortina humana; os utilizadores devem considerar a conservação do epítopo ao trabalhar com amostras de ratinho ou rato.
• Para a análise por Western blot, recomenda-se utilizar extratos proteicos de tecidos cerebrais fetais ou adultos, onde a expressão de DCX é mais elevada, e validar a deteção em torno da banda prevista de 41 kDa.
• Em aplicações de ELISA, considere utilizar um padrão de proteína Doublecortina recombinante para otimizar a sensibilidade e a especificidade do ensaio.
• Por se tratar de um anticorpo monoclonal recombinante de coelho, é expectável consistência entre lotes; no entanto, cada novo lote deve ser verificado no sistema experimental relevante.
• Para avaliar a reatividade cruzada com outros membros da família DCX ou com outras isoformas, recomenda-se o alinhamento de sequências e a realização de experiências-piloto.

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